| 摘 要： | 目的:观察以pCI-neo为载体的血管内皮生长因子-C（Vascularendothelialgrowthfactor-C,VEGF-C）反义基因转染的人胃癌细胞SGC-7901中VEGF-C蛋白的表达,并研究其对人胃癌细胞体外生长的影响。方法:应用重组质粒pCI-neo-antiVEGF-C和pCI-neo空载体质粒,以脂质体转染法转染体外培养的人胃癌细胞株,以未转染组为对照,经G418筛选抗性克隆,扩大培养后,再用免疫组化和Western-blot分析VEGF-C基因及蛋白的表达,最后用MTT法分析其对细胞生长的抑制作用。结果:免疫组化和Western-blot均显示pCI-neo-antiVEGF-C转染组无VEGF-CmRNA及其蛋白的表达,MTT检测表明pCI-neo-antiVEGF-C转染组活细胞数较其它各组均低（P<0.05）。结论:pCI-neo-antiVEGF-C成功转染人胃癌细胞SGC-7901且可封闭VEGF-CmRNA,使已转染pCI-neo-antiVEGF-C的人胃癌细胞VEGF-C蛋白的表达减少,并能抑制胃癌细胞SGC-7901的体外生长,为进一步研究VEGF-C的生物学功能及胃癌的基因治疗研究创造了条件。
|
