转染OPN-002-siRNA对大鼠颈动脉球囊损伤后内膜增生和OPN、TGF-β1、PCNA表达的影响

目的　观察经动脉外膜转染OPN-002-siRNA对大鼠颈动脉球囊损伤后内膜增生和骨桥蛋白（OPN）、转化生长因子β1（TGF-β1）及增殖细胞核抗原（PCNA）表达的影响。方法　通过前期细胞实验筛选出最敏感的OPN-002-siRNA序列作为动物实验转染基因。72只Wistar大鼠，随机分为假手术组、球囊损伤组、OPN-SCR-siRNA转染组和OPN-002-siRNA转染组。用免疫荧光、HE染色、real-time　RT-PCR和Western　blot观察大鼠颈动脉球囊损伤后内膜增生情况和OPN、TGF-β1及PCNA的表达变化，以及OPN-002-siRNA对它们的影响。结果　（1）球囊损伤术后3天未见明显的新生内膜，7天内膜开始增厚，14天时内膜增厚显著。（2）OPN、TGF-β1　mRNA和蛋白水平于术后3、7、14天时持续升高，而PCNA　mRNA和蛋白水平均于术后3天开始升高，7天达高峰，14天时下降。（3）与球囊损伤组、OPN-SCR-siRNA转染组比较，OPN-002-siRNA转染组在各个时间点新生内膜厚度明显减轻（P<0.001），OPN、TGF-β1、PCNA　mRNA和蛋白表达显著减少（P<0.001）。结论　OPN-002-siRNA可能通过特异性抑制OPN、TGF-β1、PCNA的表达，从而减轻血管损伤后的内膜增生。