| HRSP12慢病毒表达载体的构建及对宫颈癌HeLa细胞凋亡及增殖的影响 |
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| 引用本文： | 谭宽,张璇,马晓骊,黄秉仁,陈虹,陈等.HRSP12慢病毒表达载体的构建及对宫颈癌HeLa细胞凋亡及增殖的影响[J].医学研究杂志,2014,43(10):63-67. |
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| 作者姓名： | 谭宽 张璇 马晓骊 黄秉仁 陈虹 陈等 |
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| 作者单位： | 100005,中国医学科学院基础医学研究所/北京协和医学院基础学院生物化学与分子生物学系、医学分子生物学国家重点实验室 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目 |
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| 摘 要： | 目的 构建热反应蛋白12（heat-responsive protein 12,HRSP12）慢病毒表达载体pWPI-HRSP12,包装慢病毒颗粒并感染宫颈癌细胞HeLa,分析过表达的HRSP12对HeLa细胞凋亡和增殖的影响.方法 用反转录PCR扩增HRSP12全长编码顺序,构建慢病毒表达载体,利用人胚肾细胞HEK293T包装重组的慢病毒颗粒,感染HeLa细胞,用蛋白免疫印迹法检测剪切的半胱氨酸/天冬氨酸蛋白水解酶-3（caspase-3）并用MTS比色法检测HeLa细胞增殖的情况.结果 编码全长HRSP12的cDNA片段为414bp,克隆至pWPI-linker载体成功构建了慢病毒表达载体pWPI-HRSP12,包装的慢病毒颗粒能够高效感染HeLa细胞,在细胞内表达Flag-HRSP12融合蛋白.HRSP12的过表达能够引起HeLa细胞caspase-3的剪切体增多,能够抑制HeLa细胞的增殖.结论 成功构建了慢病毒表达载体pWPI-HRSP12,初步结果表明,HRSP12可能具有诱导HeLa细胞凋亡、抑制细胞增殖的活性,为进一步研究HRSP12的生物学功能奠定了基础.
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| 关 键 词： | HRSP12 慢病毒载体 细胞凋亡 |
Construction of a Lentiviral Vector Carrying HRSP12 Gene and Its Effect on HeLa Cell Apoptosis and Proliferation |
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| Tan Kuan,Zhang Xuan,Ma Xiaoli,Huang Bingren,Chen Hong,Chen Deng.Construction of a Lentiviral Vector Carrying HRSP12 Gene and Its Effect on HeLa Cell Apoptosis and Proliferation[J].Journal of Medical Research,2014,43(10):63-67. |
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| Authors: | Tan Kuan Zhang Xuan Ma Xiaoli Huang Bingren Chen Hong Chen Deng |
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| Institution: | (National Laboratory of Medical Molecular Biology, Institute of Basic Medical Sciences, CAMS and PUMC, Beijing 100005, China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | HRSP12 Lentiviral vector Cell apoptosis |
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