两种方法转染EGFP基因对脐血造血干/祖细胞体外生长影响的比较 |
| |
引用本文: | 黄晓兵,刘霆,智伟,孟文彤.两种方法转染EGFP基因对脐血造血干/祖细胞体外生长影响的比较[J].四川大学学报(医学版),2007,38(5):889-891. |
| |
作者姓名: | 黄晓兵 刘霆 智伟 孟文彤 |
| |
作者单位: | 1. 四川大学华西医院,血液科,血液病研究室,成都,610041 2. 四川大学华西医院,干细胞与组织工程实验室 |
| |
摘 要: | 目的 探讨两种非病毒载体介导增强绿色荧光蛋白基因(EGFP)转染方式对脐血干/祖细胞体外生长的影响.方法 免疫磁珠分选CD34 脐血干/祖细胞,平均分为3组,即未转染EGFP组、阳离子聚合物转染EGFP组和电穿孔转染EGFP组,将各组脐血CD34 细胞接种于人骨髓间充质干细胞(MSCs)构建的二维培养体系中在无外源性细胞因子情况下进行体外培养,7 d后进行集落形成单位(CFU)实验和高增殖潜能集落形成单位(HPP-CFU)实验.并利用荧光显微镜观察转染EGFP的CD34 细胞集落形成,Wright-Giemsa 染色了解其分化情况.结果 阳离子聚合物转染和电穿孔转染都可减少造血干/祖细胞集落形成的数目,且集落的大小也较未转染组小(P<0.05).电穿孔转染组荧光集落形成的数目多于阳离子聚合物转染组,且所形成的荧光集落更大更亮(P<0.05).两种转染方式的脐血造血干/祖细胞在体外培养后仍具有多向分化能力.结论 这两种非病毒载体介导EGFP基因转染方式均可造成脐血造血干/祖细胞生物学特性不同程度的损害.但电穿孔转染方式对于造血干/祖细胞体外生长损害较阳离子聚合物转染要小,且转染效率更高,转染基因表达更稳定.
|
关 键 词: | 脐血CD34 细胞 阳离子聚合物转染 电穿孔转染 增强绿色荧光蛋白 方法 转染效率 EGFP 基因对 脐血造血干 细胞体外 生长影响 稳定 基因表达 损害 程度 细胞生物学特性 多向分化能力 培养后 荧光显微镜 大小 结果 染色 集落形成单位 利用 |
修稿时间: | 2006-11-102007-03-09 |
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录! |
|