|
|||||
|
|
| GST-hVinexin融合蛋白表达载体的构建及其在原核细胞中的表达 | |
| 引用本文： | 沈涛,史立伟,杨礼庆,巴根,梁爽,付勤. GST-hVinexin融合蛋白表达载体的构建及其在原核细胞中的表达[J]. 解剖科学进展, 2012, 18(2): 151-153,158 |
| 作者姓名： | 沈涛 史立伟 杨礼庆 巴根 梁爽 付勤 |
| 作者单位： | 1. 中国医科大学附属盛京医院骨科,沈阳,110004 2. 中国医科大学附属盛京医院小儿外科,沈阳,110004 3. 明尼苏达大学实验病理系,美国明尼苏达州明尼艾波利斯市55455 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目，辽宁省科技厅基金 |
| 摘 要： | 目的构建GST-hVinexin融合蛋白表达载体,并在大肠埃希菌(E.coli)中诱导表达。方法从COS-7细胞中提取mRNA,反转录为cDNA。用PCR方法扩增出hVinexin基因全长,通过BamHI和SalI酶切位点将其定向插入pGEX-4T-2载体中,构建原核表达质粒pGEX-4T-2-hVinexin,并转化E.coli DH5α,通过限制性内切酶酶切电泳和DNA测序鉴定正确后,转入E.coli BL21中,经异丙基硫代β-D半乳糖苷大量诱导表达,SDS-PAGE电泳和Western blot鉴定。结果电泳后酶切结果证实hVinexin大小为990bp,测序证明成功构建了原核表达质粒GST-hVinexin,并诱导表达GST-hVinexin融合蛋白,进一步用Western blot方法验证了其融合蛋白的表达。结论成功构建了GST-hVinexin原核表达载体,并在原核细胞大肠埃希菌表达,为进一步纯化Vinexin及研究其结构与功能提供了前提基础。 |
| 关 键 词： | Vinexin 原核表达 融合蛋白 |
Construction of GST-hVinexin fusion protein expression vectors and the expression in prokaryotic cell |
|
| SHEN Tao , SHI Li-wei , YANG Li-qing , BA Gen , LIANG Shuang , FU Qin. Construction of GST-hVinexin fusion protein expression vectors and the expression in prokaryotic cell[J]. Progress of Anatomical Sciences, 2012, 18(2): 151-153,158 | |
| Authors: | SHEN Tao SHI Li-wei YANG Li-qing BA Gen LIANG Shuang FU Qin |
| Affiliation: | 1* (1.Department of Orthopedic Surgery,Shengjing Hospital of China Medical University,Shenyang 110004,China;2.Department of Pediatric Surgery,Shengjing Hospital of China Medical University,Shenyang 110004,China;3.Department of Laboratory Medicine & Pathology,University of Minnesota,Minneapolis,MN 55455,USA) |
| Abstract: | |
| Keywords: | Vinexin prokaryotic expression fusion protein |
| 本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录！ | |