| l-Caldesmon腺病毒的构建及其在ECV304细胞中的表达 |
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| 引用本文： | 褚志刚,张家平,张琼,向飞,宋华培,黄跃生. l-Caldesmon腺病毒的构建及其在ECV304细胞中的表达[J]. 第三军医大学学报, 2007, 29(12): 1145-1147 |
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| 作者姓名： | 褚志刚 张家平 张琼 向飞 宋华培 黄跃生 |
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| 作者单位： | 第三军医大学西南医院全军烧伤研究所,创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室,重庆,400038;第三军医大学西南医院全军烧伤研究所,创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室,重庆,400038;第三军医大学西南医院全军烧伤研究所,创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室,重庆,400038;第三军医大学西南医院全军烧伤研究所,创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室,重庆,400038;第三军医大学西南医院全军烧伤研究所,创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室,重庆,400038;第三军医大学西南医院全军烧伤研究所,创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室,重庆,400038 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展计划(973计划)，国家自然科学基金 |
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| 摘 要： | 目的 构建含有l-Caldesmon基因的重组腺病毒表达载体.方法 以含有l-Caldesmon全长编码序列的pCGN-CaD为模板,PCR扩增l-Caldesmon, T-A克隆,酶切亚克隆到穿梭质粒pAdtrack-CMV上,在BJ5183菌内和pAdeasy同源重组,筛选阳性克隆,酶切鉴定,线性化后脂质体法转染HEK293细胞进行包装、扩增,得到含有l-Caldesmon基因的重组腺病毒,根据报告基因GFP测定病毒滴度.将收集的病毒液感染ECV304细胞,Western blot检测l-Caldesmon蛋白的表达.结果 成功构建了含有l-Caldesmon基因的重组腺病毒载体,病毒滴度可达1×10 9U /ml.重组病毒感染后可使ECV304细胞l-Caldesmon表达较对照组增加5倍.结论 该重组腺病毒载体的构建为研究l-Caldesmon蛋白在内皮细胞中的生物学功能提供了一定的工作基础.
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| 关 键 词： | 腺病毒载体 l-Caldesmon ECV304细胞 |
| 文章编号： | 1000-5404（2007）12-1145-03 |
| 修稿时间： | 2007-01-17 |
Construction of l-Caldesmon adenovirus vector and its expression in ECV304 cells |
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| CHU Zhi-gang,ZHANG Jia-ping,ZHANG Qiong,XIANG fei,SONG Hua-pei,HUANG Yue-sheng. Construction of l-Caldesmon adenovirus vector and its expression in ECV304 cells[J]. Acta Academiae Medicinae Militaris Tertiae, 2007, 29(12): 1145-1147 |
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| Authors: | CHU Zhi-gang ZHANG Jia-ping ZHANG Qiong XIANG fei SONG Hua-pei HUANG Yue-sheng |
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| Affiliation: | State Key Laboratory of Trauma, Burns and Combined Injury, Institute of Burns, Southwest Hospital, Third Military Medical University, Chongqing 400038, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | l-Caldesmon |
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