心肌炎小鼠心肌纤维化与心脏上皮/内皮间充质转化的关系

目的:探讨心脏上皮/内皮间充质转化(EMT/EndMT)与病毒性心肌炎心肌纤维化的关系。方法:40只BALB/c小鼠随机分为2组,分别为对照组(n=16)和心肌炎组(n=24)。2组小鼠每周1次分别腹腔注射无病毒培养液或柯萨奇病毒B3(CVB3);于第7d后随机处死2组小鼠各8只,30d后处死其余存活小鼠。以苦味酸天狼星红染色检测小鼠心脏胶原容积分数(CVF),ELISA法检测血清胶原前肽的含量变化,以实时RT-PCR法和Westernblotting方法检测小鼠心脏中EMT/EndMT蛋白组包括启动因子转化生长因子β1(TGF-β1)和Wnt1、转录因子Twist1、上皮细胞标志物上皮细胞钙黏素(E-cadherin)、内皮细胞表面标志血管内皮钙黏素(VE-cadherin)、间充质蛋白如成纤维细胞特异蛋白(FSP-1)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)等的基因和蛋白表达情况。结果:急性病毒性心肌炎时,出现EMT/EndMT现象,其特征为VE-cadherin和E-cadherin丢失,FSP-1和α-SMA表达上调,启动因子TGF-β1和Wnt1表达增高,转录因子Twist1表达增加,胶原合成增多;慢性期未发现上皮/内皮细胞表型丢失,间充质标志蛋白仍表达上调,胶原合成增多,TGF-β1、Twist1和Wnt1表达依然增加。结论:EMT/EndMT参与了急性病毒性心肌炎心肌纤维化的形成,慢性期未发现EMT/EndMT参与心肌纤维化。