细菌氧化还原蛋白azurin诱导U2OS细胞凋亡过程中caspase-3的活化

目的:探讨细菌氧化还原蛋白azurin诱导人骨肉瘤细胞U2OS凋亡过程中是否有caspase-3的活化。方法:Annexin-V/PIFCM检测细胞凋亡情况,用Westernblot分析caspase-3酶原的变化,半定量RT-PCR检测caspase-3mRNA水平的改变,比色法测定caspase-3的相对活性。结果:用0、25、50、100、200mg/Lazurin处理U2OS细胞24h,随药物浓度的增加,caspase-3酶原的蛋白水平减少,caspase-3的mRNA水平增加(P<0.01)。用100mg/Lazurin分别处理细胞3、6、12、24、48h,caspase-3活性于6h开始升高,24h达高峰(为对照组的7.2倍,P<0.01),48h仍高于对照组(P<0.01);用不同浓度的azurin处理细胞,caspase-3活性呈浓度依赖性升高。结论:Azurin诱导人骨肉瘤U2OS细胞凋亡过程中有caspase-3的活化,caspase-3在azurin诱导的骨肉瘤细胞凋亡机制中发挥了重要的作用。