紫外线对角质细胞线粒体功能及凋亡的影响研究

目的：分析紫外线（UV）照射对HaCaT角质细胞系线粒体功能及凋亡的影响。方法：以紫外线低剂量（UVA2J/cm2,UVB10mJ/cm2）和高剂量（UVA6J/cm2,UVB30mJ/cm2）照射HaCaT细胞,继续培养15h,用流式细胞仪检测线粒体膜电位（△ψm）、线粒体质量（mitochondrialmass）;使用碘化丙啶（PI）进行DNA染色并用流式细胞仪检测亚二倍体分析凋亡,以及进行AnnexinV-FITC与PI共染色,用激光共聚焦显微镜观察细胞凋亡情况。结果：HaCaT细胞经紫外线照射后,△ψm下降的细胞比例随着照射剂量的增加而增加,对照组、低剂量组及高剂量组分别为7.94%±1.02%、25.87%±4.55%、39.27%±5.32%;线粒体质量降低的细胞比例同样随着照射剂量的增加而增加,对照组、低剂量组以及高剂量组分别为15.19%±1.58%、40.36%±4.41%、68.79%±5.46%。用PI检测DNA含量所产生的亚二倍体峰观测凋亡率,对照组、低剂量组以及高剂量组凋亡率分别为1.82%±0.51%、30.16%±5.47%、58.49%±5.98%。用AnnexinV-FITC/PI染色分析细胞凋亡程度,其结果与PI-DNA染色所得结果一致,对照组仅有少量细胞死亡,低剂量组凋亡细胞较对照组为多（AnnexinV-FITC单阳性细胞）,高剂量组以坏死细胞为多（AnnexinV-FITC/PI双阳性）。结论：HaCaT细胞经紫外照射后,线粒体去极化作用增强,同时线粒体质量降低,这些变化与细胞凋亡相关。