抗肿瘤坏死因子单抗对脂多糖诱导的人牙周膜成纤维细胞TRAIL和TNF-α的影响

目的:观察脂多糖对人牙周膜成纤维细胞(HPLFs)肿瘤坏死因子(TNF)受体相关凋亡诱导配体(TRAIL)和TNF-α的诱导作用及抗肿瘤坏死因子单抗(抗TNF单抗)对其的影响,探讨TNF超家族参与牙周病的可能作用机制.方法:HPLFs培养至第6代,加入不同浓度的脂多糖(0、0.1、1、10、100 μg/mL)培养24 h,分为命名为Zo组、Z0.1组、Z1组、Z10组、Z100组,并取Z1组浓度的脂多糖,在加药的同时加抗TNF单抗75 μg/mL(Z1+75组).分别采用实时荧光定量PCR法或Western blot法测定TRAIL和TNF-αmRNA或蛋白的表达.结果:Z1组、Z10组HPLFsTRAIL mRNA的表达水平显著高于Z0组或Z0.1组(均P＜0.05),Z1组与Z10组之间差异无统计学意义(P＞0.05);Z100组显著高于Z0组(P＜0.05)且与Z0.1组、Z1组和Z10组比较差异无统计学意义(均P＞0.05).Z1组或Z10组TNF-α mRNA的表达水平显著高于Z0组或Z100组(均P＜0.05);Z1组与Z10组之间,Z0组、Z0.1组和Z100组之间差异无统计学意义(均P ＞0.05).HPLFsTRAIL蛋白的表达水平在Z100组＜Z0组＜Z0.1组＜Z1组(均P＜0.05或＜0.01);Z10组显著高于Z0组或Z100组(均P＜0.01),但与Z0.1组或Z1组之间差异无统计学意义(均P ＞0.05).抗TNF单抗治疗后TRAIL mRNA及蛋白和TNF-α mRNA的表达水平显著低于Z1组(P ＜0.05和P＜0.01).TRAIL和TNF-α mRNA的表达水平呈显著直线正相关(r=0.819,n=30,P＜0.01).结论:HPLFs经脂多糖诱导后,其TRAIL和TNF-α的表达呈现先升高后下降,且随脂多糖的浓度变化而相应地变化,这种诱导作用能被抗TNF单抗所抑制.