| p300特异性siRNA载体的构建及其对心肌细胞GATA4表达的影响 |
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| 引用本文： | 孙慧超,田杰,朱静,吕铁伟,陈国珍,李娅莎. p300特异性siRNA载体的构建及其对心肌细胞GATA4表达的影响[J]. 第三军医大学学报, 2010, 32(11) |
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| 作者姓名： | 孙慧超 田杰 朱静 吕铁伟 陈国珍 李娅莎 |
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| 作者单位： | 重庆医科大学附属儿童医院:心脏中心,重庆,400014;重庆医科大学附属儿童医院:儿科研究所,重庆,400014 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金,重庆市自然科学基金 |
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| 摘 要： | 目的 构建并筛选小鼠p300特异性siRNA载体,并观察p300表达降低对心脏特异性转录因子的调控作用,为进一步研究p300介导的组蛋白乙酰化失衡对心脏发育的影响奠定基础.方法 针对小鼠p300基因的保守序列区域设计并构建3个重组质粒p300 RNAi1,p300 RNAi2和p300 RNAi3.利用阳离子脂质体将其分别转染入体外培养的乳鼠心肌细胞,分别利用RT-PCR和免疫荧光从mRNA和蛋白水平检测p300表达,判断抑制效率,并检测心脏特异性转录因子GATA4的表达水平.结果 pSOS-HUS组和p300 RNAi2组中p300 mRNA水平表达较正常对照组无明显降低,而p300 RNAi1组和p300 RNAi3组中p300 mRNA表达量较正常组有明显降低(分别为0.220 8±0.020 0,0.170 8±0.040 0,vs 0.509 5±0.030 0),且差别有统计学意义(P<0.05),抑制率分别为56.7%和66.5%.转染p300RNAi1组和转染p300RNAi3组的GATA4 mRNA表达水平(分别为0.423 1±0.110 0,0.262 7±0.080 0)明显低于正常组(0.856 4±0.070 0)和阴性对照组(0.841 5±0.040 0),差别有统计学意义(P<0.05).结论 p300特异性siRNA 质粒载体构建成功,p300 RNAi1和p300 RNAi3具有确切阻断p300蛋白表达的作用,并下调GATA4的表达.
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| 关 键 词： | RNA干扰 p300 心脏 GATA4 表观遗传学 组蛋白乙酰化 |
Construction of p300 specific siRNA vector and its effect on GATA4 expression in cardiac muscle cells |
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| Sun Huichao,Tian Jie,Zhu Jing,Lu Tiewei,Chen Guozhen,Li Yasha. Construction of p300 specific siRNA vector and its effect on GATA4 expression in cardiac muscle cells[J]. Acta Academiae Medicinae Militaris Tertiae, 2010, 32(11) |
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| Authors: | Sun Huichao Tian Jie Zhu Jing Lu Tiewei Chen Guozhen Li Yasha |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | p300 GATA4 |
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