HBsAg冲击的树突状细胞疫苗的制备及免疫活性研究

目的:探讨利用HBsAg冲击树突状细胞（Dendriticcells,DC）制备HBsAg-树突状细胞疫苗（HBsAg-DC疫苗）的基本方法并检测其免疫活性。方法:收集Lewis大鼠骨髓细胞,加入含rGM-CSF（4ng/ml）及rIL-4（8ng/ml）的RPMI1640培养7d后,加入HBSAg（100μg/ml）再培育48h,即获得HBsAg-DC疫苗。倒置显微镜观察细胞形态学变化,流式细胞仪检测其表型;单向混合淋巴细胞反应评价HBsAg-DC疫苗的细胞免疫活性。结果:采用该方法可诱导扩增出较多数量和较高纯度DCs。HBsAg冲击DCs后,明显增强DCs的T细胞刺激活性。同种异体和自体之间T淋巴细胞增殖功能没有显著差异（P>0.05）。经HBsAg冲击后第3d（培养第10d）的DCs在异体T淋巴细胞增殖反应中能够诱导出很强的增殖应答反应;MTT比色法分析显示不同密度的DCs和HBsAg-DCs经丝裂霉素C处理后,均能明显刺激同种异体T细胞增殖,且该效应随着DCs和HBsAg-DCs数量的增加而逐渐增强（P<0.01）;同密度的HBsAg-DCs比DCs的刺激作用更强,差异有显著性（P<0.01）。结论:本方法可以诱导扩增出较多数量和较高纯度DC,HBsAg-DC具有较强的抗原递呈能力。