IGF-1促进大鼠上皮根鞘HERS细胞成牙骨质分化的研究

目的:研究胰岛素样生长因子1(IGF-1)对赫特维希上皮根鞘(HERS)细胞增殖和分化的影响。方法:取出生后8 d的SD大鼠,分离纯化HERS上皮细胞,分为对照组和IGF-1干预组;CCK8检测细胞生长曲线;免疫荧光染色检测上皮细胞标记物细胞角蛋白14(CK14)、上皮细胞钙黏蛋白(E-cadherin)和间充质细胞标记物波形蛋白(Vimentin)的表达;实时定量RTPCR检测上皮细胞标记物E-cadherin,间充质细胞标记物Vimentin、神经钙黏蛋白(N-cadherin)、Ⅰ型胶原蛋白(Col1),成牙骨质分化相关基因骨涎蛋白(Bsp)、Runt相关转录因子2(Runx2)、碱性磷酸酶(Alp)等基因表达水平;茜素红染色检测细胞矿化情况。结果:HERS细胞能够同时表达上皮及间充质细胞标记物;IGF-1干预后,免疫荧光染色及实时定量RT-PCR结果显示HERS细胞上皮细胞标记物表达显著下降,间充质细胞标记物表达显著上调,并且明显促进细胞增殖(P<0.05)。矿化诱导环境下,IGF-1干预组7、14 d均显示成牙骨质分化相关基因表达显著上调,促进矿化结节形成(P<0.05)。结论:IGF-1诱导促进HERS细胞增殖、上皮-间充质转化和成牙骨质细胞向分化。