| Rotor-Gene链融解曲线法甲基化标记筛选技术的建立 |
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| 引用本文： | 莫耀南,赵贵森,郑海燕,刘良,杨渝珍. Rotor-Gene链融解曲线法甲基化标记筛选技术的建立[J]. 郑州大学学报(医学版), 2008, 43(1): 116-119 |
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| 作者姓名： | 莫耀南 赵贵森 郑海燕 刘良 杨渝珍 |
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| 作者单位： | 华中科技大学同济医学院法医学系,武汉,430030;河南科技大学法医学院,洛阳,471003;河南科技大学法医学院,洛阳,471003;华中科技大学同济医学院法医学系,武汉,430030 |
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| 摘 要： | 目的:建立基于Rotor-Gene的链融解曲线法的甲基化标记筛选技术,分析各种影响因素,评估其实用性.方法:克隆Hela细胞雄激素受体基因外显子-1的Bisulfite-PCR产物,挑出经测序证实的可以代表不同甲基化程度的一组质粒,并以之为模板,在Rotor-Gene 3 000实时定量PCR仪进行扩增和链融解,分析融链温度、链融解曲线与甲基化程度、甲基化模式的相关性及各种影响因素.结果:基于Rotor-Gene 的链融解曲线法,不仅可以区分甲基化与非甲基化,而且能够鉴别片段内细微的甲基化差异;主要的影响因素有升温幅度、缓冲液离子强度、产物浓度等.结论:基于Rotor-Gene 的链融解曲线法,可以集扩增和链融解于一体,是一种经济简便的甲基化分析技术,可用于样品的甲基化筛选.
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| 关 键 词： | DNA甲基化 链融解曲线法 亚硫酸氢盐 雄激素受体 |
| 收稿时间： | 2007-05-16 |
| 修稿时间： | 2007-05-16 |
Methylation-specific melting curve analysis with Rotor-Gene |
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| MO Yaonan,ZHAO Guisen,ZHENG Haiyan,LIU Liang,YANG Yuzhen. Methylation-specific melting curve analysis with Rotor-Gene[J]. Journal of Zhengzhou University: Med Sci, 2008, 43(1): 116-119 |
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| Authors: | MO Yaonan ZHAO Guisen ZHENG Haiyan LIU Liang YANG Yuzhen |
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| Keywords: | DNA methylation melting curve analysis bisulfite androgen receptor |
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