| 人 PDCD4启动子真核报告质粒的构建和鉴定 |
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| 引用本文： | 刘凤鸣,张霞,宋兴国,姜杨,张利宁.人 PDCD4启动子真核报告质粒的构建和鉴定[J].山东大学学报(医学版),2010,48(5):32-35. |
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| 作者姓名： | 刘凤鸣 张霞 宋兴国 姜杨 张利宁 |
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| 作者单位： | 山东大学医学院免疫学研究所,济南,250012 |
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| 基金项目： | 中国博士后科学基金(2006BS03064) |
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| 摘 要： | 目的 克隆人程序性死亡因子4(PDCD4)基因的启动子，插入荧光素酶报告基因载体中，并在细胞内检测其活性，为进一步研究PDCD4表达调控奠定基础。方法 采用PCR技术，从人基因组DNA中扩增出PDCD4启动子，插入荧光素酶报告基因载体pGL4-Basic中，测序所扩增的DNA序列，并将构建的pGL4-PDCD4-P1荧光素酶报告质粒，与内参照pRL-TK用脂质体法瞬时共转染OVCAR3，SKOV3细胞系，通过双荧光素酶活性检测确定其启动子活性。结果 测序结果表明，扩增的PDCD4启动子序列正确，pGL4-PDCD4-P1转染OVCAR3细胞(高表达内源性PDCD4) 24h后，双荧光素酶活性检测显示其启动子相对活性约为pGL4-Basic空载体的67倍；而pGL4-PDCD4-P1转染低表达内源性PDCD4的SKOV3细胞后相对活性约为15倍。结论 成功构建了PDCD4启动子的克隆及人PDCD4启动子报告基因，为后续研究奠定了基础。
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| 关 键 词： | 程度性死亡因子4 启动子 荧光素酶 报告基因 |
| 收稿时间： | 2009-12-21 |
Construction and identification of the human PDCD4 promotor luciferase reporter plasmid |
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| LIU Feng-ming,ZHANG Xia,SONG Xing-guo,JIANG Yang,ZHANG Li-ning.Construction and identification of the human PDCD4 promotor luciferase reporter plasmid[J].Journal of Shandong University:Health Sciences,2010,48(5):32-35. |
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| Authors: | LIU Feng-ming ZHANG Xia SONG Xing-guo JIANG Yang ZHANG Li-ning |
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| Institution: | Institute of Immunology, School of Medicine, Shandong University, Jinan 250012, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Programmed cell death 4 Promotor Luciferase Reporter gene |
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