不同接种密度骨髓间充质干细胞/骨基质明胶复合体修复大鼠桡骨缺损

背景：在构建种子细胞与载体材料的复合体时，种子细胞的接种密度是影响复合体成骨能力的一个重要因素，目前关于种子细胞的接种密度认识尚不统一。目的：构建骨髓间充质干细胞/骨基质明胶复合体，观察构建复合体骨髓间充质干细胞的最适接种密度。方法：体外单层培养SD大鼠骨髓间充质干细胞，以不同的细胞密度将骨髓间充质干细胞接种到异种骨基质明胶上，构建骨髓间充质干细胞/骨基质明胶复合体，通过扫描电子显微镜观察细胞在骨基质明胶中的黏附生长情况。制备SD大鼠双侧桡骨骨干5 mm节段性骨缺损模型。随机分成4组，采用骨髓间充质干细胞/骨基质明胶复合体修复骨缺损，所用的接种细胞密度分别为1×108 L-1、5×108 L-1、1×109 L-1、5×109 L-1。各组于第2，4，8，12周取材，通过大体观察大鼠的术肢活动情况，X射线放射学、组织学，免疫组织化学等检测方法，对骨缺损的修复情况进行评价。结果与结论：4种细胞密度与骨基质明胶复合培养24 h，骨髓间充质干细胞在骨基质明胶上的黏附率随着细胞接种密度的增高而增高，当密度为1×109 L-1时，黏附率最高为(76.00±2.94)%，继续增加细胞密度其黏附率反呈下降趋势。复合培养7 d，扫描电子显微镜观察结果显示，材料上均有细胞黏附生长。X射线放射学评分显示，同一组别8，12周评分均高于2周评分(P < 0.01)；第4，8，12周1×109 L-1组与5×109 L-1组差异无显著性意义 (P > 0.05)，均高于其余两组(P < 0.01)。组织学评分结果表明，同一组别8，12周评分均高于2周评分 (P < 0.01)。结果提示，在构建骨髓间充质干细胞/骨基质明胶复合体时，骨髓间充质干细胞接种密度维持在1×109 L-1最佳。

Different incubation densities of bone marrow mesenchymal stem cells and bone matrix gelatin complex in repair of radius defects in rats