内质网应激对ATF6调控XBP1启动子转录的影响 |
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引用本文: | 赵文君,朱慧芳,周菁华,李祥柱,刘艳娜,郭风劲.内质网应激对ATF6调控XBP1启动子转录的影响[J].解放军医学杂志,2012,37(4):317-321. |
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作者姓名: | 赵文君 朱慧芳 周菁华 李祥柱 刘艳娜 郭风劲 |
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作者单位: | 400016,重庆 重庆医科大学细胞生物学及遗传学教研室 |
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基金项目: | 国家自然科学基金(31040019,81171697)~~ |
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摘 要: | 目的 确定XBP1启动子的转录核心区域,探讨激活转录因子6(ATF6)在内质网应激(ERS)与非ERS状态下对XBP1启动子转录活性的调控作用.方法 采用基因重组技术构建ATF6基因及两个缺失体ATF6s1p、ATF6s2p的真核表达载体pcDNA3.1 (-)-ATF6、pcDNA3.1 (-)-s1p、pcDNA3.1(-)-s2p,以及XBP1启动子报告基因载体pGL3-XBP1.针对XBP1启动子的各个组成元件设计和构建XBP1一系列截短体的报告基因载体.采用双荧光素酶报告基因法检测并确定XBP1启动子的核心启动子区,Western blotting检测ATF6及缺失体s2p、s1p在ERS与非ERS状态下对XBP1核心启动子区转录的调控作用.结果 XBP1启动子的-407bp-+133bp区域是转录活性调控的核心区域,-2000bp--407bp区域不具有转录活性,该区域可能含有抑制转录活性的组成元件.非ERS状态时,ATF6及两个缺失体s2p、s1p可明显上调XBP1启动子的转录活性及XBP1蛋白表达;而在ERS状态时,ATF6及两个缺失体s2p、s1p下调了XBP1启动子的转录活性和XBPl蛋白表达.结论 ATF6对XBP1的转录调控作用在ERS状态和非ERS状态下存在差异.非ERS状态时,ATF6上调XBP1的转录和表达,而ERS状态时,ATF6下调XBP1的转录和表达.
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关 键 词: | 激活转录因子6 基因表达调控 转录启动子 |
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