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下调miR-92a通过调控PIAS3抑制ox-LDL诱导RAW264.7细胞炎症介质分泌和脂质蓄积
引用本文:胡威威,陈丽曼,刘智芬. 下调miR-92a通过调控PIAS3抑制ox-LDL诱导RAW264.7细胞炎症介质分泌和脂质蓄积[J]. 中国动脉硬化杂志, 2018, 26(11): 1119-1126
作者姓名:胡威威  陈丽曼  刘智芬
作者单位:河北医科大学附属哈励逊国际和平医院老年病一科,河北省衡水市 053000,河北医科大学附属哈励逊国际和平医院老年病一科,河北省衡水市 053000,河北医科大学附属哈励逊国际和平医院老年病一科,河北省衡水市 053000
基金项目:衡水市科技计划项目(15018)
摘    要:
目的探讨下调miR-92a对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导RAW264.7细胞炎症介质分泌和脂质蓄积的影响及其机制。方法以不同浓度(0、25、50、100 mg/L)的ox-LDL处理RAW264.7细胞24 h或以100 mg/L ox-LDL分别处理RAW264.7细胞0、12、24 h后,采用定量实时聚合酶链反应(qRT-PCR)检测ox-LDL对miR-92a表达的影响。建立miR-92a低表达的RAW264.7细胞株,并给予100 mg/L ox-LDL处理后,用qRT-PCR、油红O染色、一氧化氮(NO)荧光探针(DAF-FMDA)和Western blot检测下调miR-92a表达对ox-LDL诱导的RAW264.7细胞中炎症因子诱导型一氧化氮合酶(i NOS)、白细胞介素6(IL-6)和IL-1β表达、脂质蓄积以及信号转导子和转录激活子3(STAT3)信号通路相关蛋白p-STAT3、STAT3蛋白表达的影响。建立活化STAT3蛋白抑制分子(PIAS3)和miR-92a低表达的RAW264.7细胞株,并给予100 mg/L ox-LDL处理后,观察沉默PIAS3表达对ox-LDL作用下miR-92a低表达的RAW264.7细胞中炎症因子、脂质蓄积以及STAT3信号通路的影响。Target Scan软件预测和双荧光素酶报告实验验证miR-92a和PIAS3的靶向关系。结果随着ox-LDL作用时间和浓度的增加,RAW264.7细胞中miR-92a表达升高;双荧光素酶报告实验验证PIAS3是miR-92a的靶基因。采用ox-LDL处理后RAW264.7细胞中miR-92a、i NOS、IL-6、IL-1β、p-STAT3表达升高,NO释放增多和细胞内脂滴升高,而PIAS3的表达下降。这种调控作用可被anti-miR-92a所抑制;而沉默PIAS3后,anti-miR-92a的这一抑制作用得以恢复。结论下调miR-92a可通过调控PIAS3抑制ox-LDL诱导RAW264.7细胞炎症介质分泌和脂质蓄积。

关 键 词:RAW264.7细胞  氧化型低密度脂蛋白  miR-92a  炎症介质  脂质蓄积
收稿时间:2018-06-07
修稿时间:2018-08-09

Down-regulation of miR-92a inhibits ox-LDL induced secretion of inflammatory mediators and lipid accumulation in RAW264.7 cells by regulating PIAS3
HU Weiwei,CHEN Liman and LIU Zhifen. Down-regulation of miR-92a inhibits ox-LDL induced secretion of inflammatory mediators and lipid accumulation in RAW264.7 cells by regulating PIAS3[J]. Chinese Journal of Arteriosclerosis, 2018, 26(11): 1119-1126
Authors:HU Weiwei  CHEN Liman  LIU Zhifen
Affiliation:Department of Geriatrics, Harrison International Peace Hospital Affiliated to Hebei Medical University, Hengshui, Hebei 053000, China,Department of Geriatrics, Harrison International Peace Hospital Affiliated to Hebei Medical University, Hengshui, Hebei 053000, China and Department of Geriatrics, Harrison International Peace Hospital Affiliated to Hebei Medical University, Hengshui, Hebei 053000, China
Abstract:
Keywords:RAW264.7 cell   oxidized low density lipoprotein   miR-92a   inflammatory mediator   lipid accumulation
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