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miRNA-20a在膀胱癌中的表达及其机制研究
作者姓名:陈玉锦  王剑松  颜汝平  柯昌兴  丁明霞  栾婷  邹仁超  王海峰
作者单位:①.昆明医科大学第二附属医院泌尿外科,云南省泌尿外科研究所(昆明市 650101)
基金项目:本文课题受国家自然科学基金项目(81460384),云南省科技计划项目(2015FB196),云南省教育厅科学研究基金项目(编号:2014Z072)资助 This work was supported by the National Natural Science Foundation of China(81460384),Project of Yunnan Provincial Science and Technology(2015FB196),Yunnan Provincial Department of Education Fund(2014Z072)
摘    要:  目的  探讨miRNA-20a在膀胱癌组织中的表达及其机制。  方法  收集2014年1月至2015年1月昆明医科大学第二附属医院96例患者的组织标本,运用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)方法检测miRNA-20a在膀胱癌组织和癌旁组织中的表达;生物信息学方法预测miRNA-20a的靶基因并采用双荧光素酶报告基因实验进行验证;qRT-PCR、Western blot以及细胞免疫荧光分别检测人膀胱癌细胞系T24和J82细胞转染miRNA-20a模拟物或阴性对照后对靶基因mRNA和蛋白表达的影响;CCK-8、Transwell侵袭小室和划痕实验检测过表达miRNA-20a后T24细胞体外增殖、迁移和侵袭能力的改变。  结果  miRNA-20a在膀胱癌组织中高表达,且与肿瘤的病理分级、临床分期、转移以及复发密切相关(P<0.001);双荧光素酶报告基因实验证实miRNA-20a与人源性长寿保障基因2(Homo sapiens longevity assurance homologue 2,LASS2)的3'-UTR直接靶向结合;转染miRNA-20a模拟物可显著下调膀胱癌细胞中LASS2 mRNA和蛋白的表达(P<0.01),增强膀胱癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力(P<0.01)。  结论  miRNA-20a在膀胱癌组织中高表达,且miRNA-20a可通过靶向抑制LASS2促进膀胱癌细胞的增殖、侵袭和迁移,与膀胱癌的发生发展相关。 

关 键 词:miRNA-20a   LASS2   膀胱癌
收稿时间:2017-04-10
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