| 应用抑制消减杂交技术构建肝癌差异表达基因消减cDNA文库 |
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| 引用本文： | 李靖,杨彤翰,梁平,韩本立,黄桂君,钱桂生,陈杰,徐晓霞. 应用抑制消减杂交技术构建肝癌差异表达基因消减cDNA文库[J]. 第三军医大学学报, 2001, 23(6): 698-701 |
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| 作者姓名： | 李靖 杨彤翰 梁平 韩本立 黄桂君 钱桂生 陈杰 徐晓霞 |
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| 作者单位： | 第三军医大学附属新桥医院肝胆外科,;第三军医大学附属西南医院全军肝胆外科研究所、西南肝胆外科医院,;第三军医大学附属新桥医院全军呼吸内科研究所;第三军医大学附属新桥医院皮肤科 |
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| 基金项目： | 重庆市卫生局医学科研基金资助 (0 0 2 0 0 1 ) |
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| 摘 要： | 目的 构建肝癌及癌旁肝细胞差异表达基因的消减cDNA文库。方法 采用新近建立的抑制消减杂交方法,以肝癌组织及癌旁肝组织作为对比材料,分离肝癌组织中差异表达基因的cDNA片段,将其与T载体进行T／A连接构建文库,将连接产物用电穿孔法转化大肠杆菌进行文库扩半后,随机挑取100个白色克隆及菌落PCR进行鉴定。结果 扩增消减cDNA文库获得3000余个白色阳性克隆,随机挑取100个白色克隆用PCR进行扩增,95％的克隆中均有100－600bp的插入片段,这些片段可能是肝癌差异表达基因的cDNA片段。结论 用SSH法及T／A克隆技术成功构建了肝癌与癌旁肝组织差异表达基因消减cDNA文库,该消减cDNA文库的建立为进一步筛选,克隆肝癌差异表达的新基因奠定了基础。
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| 关 键 词： | 肝肿瘤 抑制消减杂交 基因文库 |
| 文章编号： | 1000-5404(2001)06-0698-04 |
| 修稿时间： | 2001-01-31 |
Construction of a differentially expressed genes subtracted cDNA library of human primary hepatocellular carcinoma by suppression subtractive hybridization |
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| LI Jing,HAN Ben li,HUANG Gui jun,QIAN Gui sheng,XU Xiao xia,YANG Tong han,LIANG Ping,CHEN Jie. Construction of a differentially expressed genes subtracted cDNA library of human primary hepatocellular carcinoma by suppression subtractive hybridization[J]. Acta Academiae Medicinae Militaris Tertiae, 2001, 23(6): 698-701 |
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| Authors: | LI Jing HAN Ben li HUANG Gui jun QIAN Gui sheng XU Xiao xia YANG Tong han LIANG Ping CHEN Jie |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | liver neoplasm suppression substoactive hybridiztion library |
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