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人心肌肌钙蛋白Ⅰ化学发光免疫分析方法的建立
引用本文:吴国球劳心珍,孙宏伟黄立新张粉梅,钱娟英卢惠霞. 人心肌肌钙蛋白Ⅰ化学发光免疫分析方法的建立[J]. 临床检验杂志, 2004, 22(5): 323-327
作者姓名:吴国球劳心珍  孙宏伟黄立新张粉梅  钱娟英卢惠霞
作者单位:东南大学附属中大医院临床检验中心;中国药科大学生物技术中心,南京,210009
基金项目:本文部分内容专利申请号:03131796.0,公开号:CN1474185A.
摘    要:目的 建立检测人心肌肌钙蛋白I(cTnI)化学发光免疫分析方法。方法 用重组cTnI免疫新西兰兔获得抗体 ,经DEAE 2 3层析和 (NH4) 2 SO4沉淀纯化后 ,用碳化二亚胺 (EDC)法标记辣根过氧化物酶 ,SephadexG 2 0 0纯化。优化鲁米诺 H2 O2 肉桂酸发光体系 ,建立了cTnI化学发光免疫分析法。用该法检测 138例正常人及病人血清标本 ,确定正常值参考范围 ,并与ELISA法比较。结果 所得抗体的滴度为 1∶80 0 0。优化后的发光体系为 :鲁米诺 (4 .5mmol/L) ,H2 O2 (7.5mmol/L) ,四苯硼钠 (0 .8mmol/L) ,肉桂酸 (0 .4mmol/L) ,比单独用肉桂酸或四苯硼钠作增强剂灵敏度分别增加了 1.19和 1.0 5倍。本法检测灵敏度为0 .2ng/ml,线性范围为 0 .4~ 5 0ng/ml,批内CV平均 9.0 % ,批间CV平均 11.8% ,回收率为 10 4 .2 %。Hb浓度在 0~ 5 0nmol/L ,T Bil在 0~ 15 μmol/L ,TG在 0~ 2 .0mmol/L对测定结果无影响。与ELISA比较 ,两法结果一致 (P >0 0 5 ) ,相关系数r=0 .985 2(P <0 .0 1)。用BioCheck标准品为校正物 ,确定临床诊断参考范围为 <2 .12ng/ml,诊断符合率为 96 .2 %。结论 建立的cTnI化学发光免疫分析法可常规用于临床检验。

关 键 词:人心肌肌钙蛋白Ⅰ  化学发光免疫分析  心血管疾病
文章编号:1001-764X(2004)05-0323-05
修稿时间:2003-12-25

Establishment of chemiluminescent immunoassay for determination of human cardiac troponin I (cTnI)
WU Guoqiu,LAO Xinzhen,SUN Hongwei,HUANG Lixing,ZHANG Fenmei,QIAN Juanying,LU Huixi,SHEN Zilong. Establishment of chemiluminescent immunoassay for determination of human cardiac troponin I (cTnI)[J]. Chinese Journal of Clinical Laboratory Science, 2004, 22(5): 323-327
Authors:WU Guoqiu  LAO Xinzhen  SUN Hongwei  HUANG Lixing  ZHANG Fenmei  QIAN Juanying  LU Huixi  SHEN Zilong
Affiliation:WU Guoqiu1,LAO Xinzhen2,SUN Hongwei1,HUANG Lixing1,ZHANG Fenmei1,QIAN Juanying1,LU Huixia1,SHEN Zilong2
Abstract:
Keywords:human cardiac troponin I  chemiluminescent immunoassay  experimental method
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