| DSB修复基因hKu70反义RNA真核表达载体构建 |
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| 引用本文： | 刘起展,庄志雄,江高峰,何云,杜柳涛.DSB修复基因hKu70反义RNA真核表达载体构建[J].卫生毒理学杂志,2002,16(4):197-199. |
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| 作者姓名： | 刘起展 庄志雄 江高峰 何云 杜柳涛 |
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| 作者单位： | [1]中山大学公共卫生学院卫生毒理学教研室，广东广州510089 [2]深圳市疾病预防控制中心 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助 (39970 636) |
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| 摘 要： | 目的 构建人DNA双链断裂（DSB）修复基因hKu70反义RNA真核表达载体pEGFP-C1-K，为以后的hKu70基因功能和毒理学研究提供实验材料。方法 提取人胚肺成纤维细胞（HLF）总RNA，逆转录酶-多聚酶链式反应（RT-PCR）扩增hKu70基因cDNA保守序列，经与pGEM-T载体连接，筛选，克隆，抽提质粒和双酶切后，将纯化的hKu70基因cDNA保守序列反向插入绿色荧光蛋白表达载体pEGFP-C1中，筛选，克隆，抽提质粒，从而构建hKu70基因反义RNA真核表达载体pEGFP-C1-K。结果 经RT-PCR获得467bp含限制性内切酶位点的DNA片段，T载体克隆后经双酶切，测序，确定该片段为hKu70基因cDNA，进而构建反义RNA真核表达载体pEGFP-C1-K，并双酶切，测序确证。结论 成功构建hKu70基因反义RNA真核表达载体pEGFP-C1-K，为建立该基因低表达细胞株，DNA双链断裂修复缺陷和有关毒理学研究提供工具。
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| 关 键 词： | DNA双链断裂 hKn70 逆转录酶－多聚酶链式反应 修复基因 真核表达载体 反义RNA DNA损伤 卫生毒理学 |
| 文章编号： | 1002-3127(2002)04-00197-03 |
| 修稿时间： | 2002年7月10日 |
Construction of eukaryotic expression vector of DNA double-strand break repair gene hKu70 antisense RNA |
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| LIU Qi\|zhan,ZHUANG Zhi\|xiong,JIANG Gao\|feng,et al..Construction of eukaryotic expression vector of DNA double-strand break repair gene hKu70 antisense RNA[J].Journal of Health Toxicology,2002,16(4):197-199. |
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| Authors: | LIU Qi\|zhan ZHUANG Zhi\|xiong JIANG Gao\|feng |
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