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结核分枝杆菌Rv3529c蛋白的生信分析及原核表达
引用本文:陈瑞枫,王瑄,马枫茜,李祥芳,丁寿鹏,吴利先.结核分枝杆菌Rv3529c蛋白的生信分析及原核表达[J].中国感染控制杂志,2023(6):621-628.
作者姓名:陈瑞枫  王瑄  马枫茜  李祥芳  丁寿鹏  吴利先
作者单位:1.大理大学基础医学院医学微生物学与免疫学教研室;2.南昌大学玛丽女王学院
基金项目:国家自然科学基金项目(81260456);云南省地方本科高校基础研究重点项目(202101BA07111-038)
摘    要:目的 通过生物信息学软件预测结核分枝杆菌Rv3529c基因编码蛋白的结构和功能,并对其进行原核表达。 方法 利用UniproKB数据库、PredictProtein服务、AlphaFold系统、SWISS -MODEL服务、ProtParam蛋白分析工具、ProtScale、DeepTMHMM服务和SignalP-5.0服务、ProtCompB方法、IEDB数据库和STRING数据库等生物信息学预测软件对Rv3529c编码蛋白的二级和三级结构、理化性质、疏水性、信号肽、跨膜区、亚细胞定位及免疫表位进行分析预测。利用分子克隆技术构建表达质粒载体pET-32a-Rv3529c并进行原核表达,运用UniprotKB数据库的Blast工具对氨基酸序列进行比对,采用MEGA 11软件构建进化树,进行系统进化分析,运用STRING数据库分析蛋白间相互作用。 结果 Rv3529c基因全长1 155 bp,共编码384个氨基酸。Rv3529c基因编码蛋白分子量为43.35 kDa,等电点为6.04,二级结构以α-螺旋为主,该蛋白为稳定的亲水性蛋白,无跨膜区、无信号肽,预测该蛋白亚细胞定位在细胞质中或细胞膜上,存在多个抗原抗体表位,与多个蛋白质有相互作用。经克隆、表达、鉴定、纯化后获得浓度和纯度较高的Rv3529c蛋白。 结论 成功克隆、表达、纯化结核分枝杆菌Rv3529c蛋白,并初步预测其结构及功能。

关 键 词:结核分枝杆菌  Rv3529c蛋白  原核表达  生物信息学  表位
收稿时间:2022/11/30 0:00:00

Bioinformatics analysis and prokaryotic expression of the protein Rv3529c of Mycobacterium tuberculosis
Rui-feng CHEN,Xuan WANG,Feng-xi MA,Xiang-fang LI,Shou-peng DING,Li-xian WU.Bioinformatics analysis and prokaryotic expression of the protein Rv3529c of Mycobacterium tuberculosis[J].Chinese Journal of Infection Control,2023(6):621-628.
Authors:Rui-feng CHEN  Xuan WANG  Feng-xi MA  Xiang-fang LI  Shou-peng DING  Li-xian WU
Institution:1.Department of Medical Microbiology and Immunology, School of Basic Medical Sciences, Dali University, Dali 671000, China;2.Nanchang University Queen Mary School, Nanchang 330031, China
Abstract:
Keywords:Mycobacterium tuberculosis  Rv3529c protein  prokaryotic expression  bioinformatics  epitopes
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