家兔主动脉粥样斑块内血管内皮生长因子表达与煦少火胶囊的干预

目的:根据《素问·阴阳应象大论》"少火之气壮"的理论研制的"煦少火"复方中药在冠心病的治疗中虽取得较好的效果,但其作用途径需深入探讨。实验观察了其对家兔动脉粥样斑块血管内皮生长因子表达的影响,以验证作用机制。方法:实验于2005-01/2007-05在河北医科大学中西医结合基础实验室完成。①材料:清洁级健康新西兰纯种雄性大白兔64只,体质量(2.5±0.5)kg;煦少火胶囊(由附子、西洋参、石菖蒲、丹参、枳壳等组成);通心络胶囊(石家庄以岭药业股份有限公司),辛伐他汀(北京万生药业有限公司)。②分组:将兔随机分成5组:空白对照组、高脂造模组、辛伐他汀组、通心络组、煦少火胶囊组,每组各12只。③给药:空白对照组喂正常饲料,其余各组均喂高脂肪饲料8周,构建实验性家兔主动脉粥样硬化模型。辛伐他汀组喂服辛伐他汀药液[2.5mg/(kg·d)];通心络组喂服通心络药液[1.0g/(kg·d)];煦少火胶囊组喂服煦少火药液[1.0g/(kg·d)],继续喂养4周。④评估:观察各组血清低密度脂蛋白胆固醇,一氧化氮,乳酸脱氢酶及血管形态学的变化;采用免疫组织化学,反转录聚合酶链式反应及WesternBlot蛋白印迹方法,从不同水平观察煦少火胶囊、通心络及辛伐他汀对动脉粥样斑块血管内皮生长因子表达的影响。结果:4只兔验证模型是否成功。60只家兔进入结果分析。①与空白对照组比较,高脂模型组的血清总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇增高,高密度脂蛋白胆固醇降低(均P<0.01);血清乳酸脱氢酶增高,一氧化氮降低(均P<0.01);光镜下观察家兔整条主动脉内膜粗糙不平,有大量粥样硬化斑块形成;血管内皮生长因子免疫组织化学染色为强阳性表达(P<0.01),反转录-聚合酶链反应分析呈现强亮度条带(P<0.05),Westernblot蛋白印迹分析增高(P<0.01)。②与高脂模型组比较,煦少火组、通心络组、辛伐他汀组的血清总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇降低,(均P<0.01);血清乳酸脱氢酶降低,一氧化氮升高(均P<0.01);主动脉内膜粥样硬化斑块较少、程度轻,主要限于主动脉弓段和分叉处(P<0.01);血管内皮生长因子免疫组织化学染色为弱阳性表达(P<0.01),反转录-聚合酶链反应分析可见模糊条带;Western blot蛋白印迹分析降低(均P<0.01)。结论:"煦少火胶囊"减少动脉粥样斑块血管内皮生长因子表达,降低血清低密度脂蛋白胆固醇及乳酸脱氢酶的浓度,升高一氧化氮浓度;其可通过降低血管内皮生长因子在粥样斑块中的表达,实现稳定粥样斑块,延缓动脉粥样硬化进程的作用。

Influence of Xushaohuo capsule on the vascular endothelial growth factor expression in rabbit aortic atherosclerotic plaques