高效液相色谱法测定α1,2岩藻糖基转移酶活性

目的:利用反相高效液相色谱技术建立α-1,2岩藻糖基转移酶活性的测定方法。方法:反应混合物处理后进样,以90%的20 mmol/L KH2PO4(含5%四丁基溴化铵)和10%甲醇为流动相,254 nm波长下检测底物β-苯酰半乳糖苷的减少量。结果:方法回收率≥97%,变异系数为1.66%,准确度和精密度都较高。β-苯酰半乳糖苷峰单一,无其它杂峰干扰。反应管与对照管相比,β-苯酰半乳糖含量明显降低。结论:建立的反相高效液相色谱法测定α-1,2岩藻糖基转移酶方法可靠,适合于常规检测和体外表达研究。