| 多西环素多克隆抗体的制备及鉴定 |
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| 引用本文： | 王军,尹蕾,蒋砚秋,禚娅,刘霞,王荟,张苗苗,杜凤移,夏圣,邵启祥.多西环素多克隆抗体的制备及鉴定[J].江苏大学学报(医学版),2015(2):98-102. |
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| 作者姓名： | 王军 尹蕾 蒋砚秋 禚娅 刘霞 王荟 张苗苗 杜凤移 夏圣 邵启祥 |
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| 作者单位： | 江苏大学医学院;武汉市妇女儿童医疗保健中心检验科;扬中市人民医院检验科;鹤壁市第一人民医院检验科 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(81273202) |
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| 摘 要： | 目的:采用人工偶联方法构建多西环素完全抗原,制备多克隆抗体。方法:分别采用直接偶联法、甲醛一步法、重氮法+混合酸酐法和重氮法+碳二亚胺法等4种方法将多西环素与牛血清白蛋白(bull serum albumin,BSA)或鸡卵清蛋白(ovalbumin,OVA)分别偶联,构建人工完全抗原。选择最好偶联效果制备的抗原免疫BALB/c小鼠,通过直接ELISA法检测多克隆抗体效价,竞争抑制ELISA法分析其灵敏性及特异性。结果:重氮法+碳二亚胺法偶联的多西环素人工完全抗原效果最好,其与BSA的偶联比为8.37∶1,与OVA的偶联比为4.92∶1。采用该方法偶联的抗原免疫小鼠获得的多克隆抗体效价在1∶8 000以上;该抗体对多西环素的半数抑制浓度(IC50)为98.89~120.32μg/L,与其他四环素类药物的交叉反应性较低。结论:重氮法+碳二亚胺法的偶联效率最高,获得的多西环素多克隆抗体效价较高,特异性和灵敏度均较理想。
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| 关 键 词： | 多西环素 多克隆抗体 偶联 鉴定 |
Preparation and identification of doxycycline polyclonal antibody |
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| WANG Jun;YIN Lei;JIANG Yan-qiu;ZHUO Ya;LIU Xia;WANG Hui;ZHANG Miao-miao;DU Feng-yi;XIA Sheng;SHAO Qi-xiang.Preparation and identification of doxycycline polyclonal antibody[J].Journal of Jiangsu University Medicine Edition,2015(2):98-102. |
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| Authors: | WANG Jun;YIN Lei;JIANG Yan-qiu;ZHUO Ya;LIU Xia;WANG Hui;ZHANG Miao-miao;DU Feng-yi;XIA Sheng;SHAO Qi-xiang |
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| Institution: | WANG Jun;YIN Lei;JIANG Yan-qiu;ZHUO Ya;LIU Xia;WANG Hui;ZHANG Miao-miao;DU Feng-yi;XIA Sheng;SHAO Qi-xiang;School of Medicine,Jiangsu University;Department of Clinical Laboratory,Wuhan Women and Children Medical Care Center;Department of Clinical Laboratory,People’s Hospital of Yangzhong;Department of Clinical Laboratory,the First People’s Hospital of Hebi; |
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