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实时PCR检测HSV-2的方法学建立
引用本文:邓念华,张德纯. 实时PCR检测HSV-2的方法学建立[J]. 中华微生物学和免疫学杂志, 2006, 26(4): 375-378
作者姓名:邓念华  张德纯
作者单位:400016,重庆医科大学临床微生物教研室,重庆市重点实验室
基金项目:南宁市科委攻关项目(南科[2003]27号)
摘    要:
目的建立一种快速、特异、准确定量的单纯疱疹病毒2型(HSV-2)检测方法。方法构建重组质粒pMD18-T-gG作为标准品。以HSV-2的gG基因区为靶基因区,设计合成引物和探针,采用TaqMan MGB技术对HSV-2进行实时定量PCR检测,优化反应体系,并进行方法学评价。结果成功构建重组质粒pMD18-T-gG。建立利用TaqMan MGB技术的,real-time PCR方法,其重复性较好[批内 CV(变异系数)值为2.29%,批间CV值为4.76%]、特异性较好(对HSV-1、Vero细胞、巨细胞病毒、弓形虫等无特异性扩增)、线性范围好(4.75×10~1-4.75×10~6 copies/μ1,r=0.998),灵敏度达到47.5 cop- ies/μl;与ELISA法进行比较,认为前者的灵敏度更高、检测时间更短。结论建立的TaqMan MGB PCR 方法能够快速准确、特异、灵敏地对HSV-2进行定量分析,可为临床诊断提供帮助。

关 键 词:实时定量PCB  单纯疱疹病毒2型  生殖器疱疹
修稿时间:2005-10-08

Establishment of real-time PCR method for detecting HSV-2
DENG Nian-hua,ZHANG De-chun. Establishment of real-time PCR method for detecting HSV-2[J]. Chinese Journal of Microbiology and Immunology, 2006, 26(4): 375-378
Authors:DENG Nian-hua  ZHANG De-chun
Abstract:
Keywords:Real-time PCR  HSV-2  Genital herpes  
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录!
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