幽门螺杆菌尿素酶B亚单位基因克隆表达及临床应用

目的 获得重组表达的人幽门螺杆菌（Hp)尿素酶B亚单位蛋白（UreB)，并将其运用于Hp感染的临床检测。方法 应用聚合酶链反应（PCR）技术从临床分离的Hp菌株基因组中扩增出编码UreB的基因（ureB)，将其克隆于质粒PinPoint^TMXa-Ⅲ上进行序列分析和蛋白表达，通过亲和层析得到纯化的重组UreB蛋白并用于113例消化性溃疡患者Hp感染的酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测。结果 克隆的ureB基因核苷酸序列与GenBank公布的序列相比较，同源性为96.44%，推定氨基酸序列同源性为99.65%。纯化的重组UreB蛋白相对分子量约为66000，纯度为90%以上，并保持较好的免疫原性。应用纯化的重组UreB蛋白联合ELISA法检测113例消化性溃疡患者Hp感染的灵敏度和特异性分别为92.0%、98.5%。结论 重组UreB蛋白作为抗原用于ELISA法检测Hp感染，保持了较高的灵敏度和特异性，可用于Hp感染的临床检测与诊断、疗效判定及流行病学研究。

Cloning and expression of urease B subunit (UreB) of Helicobacter pylori