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细胞毒素Gelonin的亚克隆、表达与纯化
引用本文:李卓玉,郭晨云,袁静明. 细胞毒素Gelonin的亚克隆、表达与纯化[J]. 药物生物技术, 2002, 9(4): 191-195
作者姓名:李卓玉  郭晨云  袁静明
作者单位:山西大学生物工程研究中心,山西,太原,030006
基金项目:山西省自然科学基金资助项目(20011027)
摘    要:将分别含有细胞毒素gelonin基因片段的重组子pUC-gell和pUC-gelⅡ,按照预先设计的酶切位点,通过亚克隆得到含有gelonin全基因的重组子pUC-gel。然后将pUC-gel与pET28a同时用NdeI/EcoRI双酶切,相关片段构建成表达重组子pET-gel,并进行DNA序列测定。工程菌E.coli BL21/pET-gel表达产物经两步SP-Sepharose柱层析,可得电泳纯的重组gelonin,分子质量为28000u。无细胞体系蛋白质合成实验表明,其IC50(使蛋白质合成抑制50%所需浓度)为35μg/L。酶联免疫实验为阳性。

关 键 词:细胞毒素 Gelonin 亚克隆 表达 纯化
文章编号:1005-8915(2002)04-0191-04

Subclone, Expression and Purificatin of Cytotoxin Gelonin
Abstract:
Keywords:Gelonin
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