细胞毒素Gelonin的亚克隆、表达与纯化 |
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引用本文: | 李卓玉,郭晨云,袁静明. 细胞毒素Gelonin的亚克隆、表达与纯化[J]. 药物生物技术, 2002, 9(4): 191-195 |
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作者姓名: | 李卓玉 郭晨云 袁静明 |
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作者单位: | 山西大学生物工程研究中心,山西,太原,030006 |
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基金项目: | 山西省自然科学基金资助项目(20011027) |
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摘 要: | 将分别含有细胞毒素gelonin基因片段的重组子pUC-gell和pUC-gelⅡ,按照预先设计的酶切位点,通过亚克隆得到含有gelonin全基因的重组子pUC-gel。然后将pUC-gel与pET28a同时用NdeI/EcoRI双酶切,相关片段构建成表达重组子pET-gel,并进行DNA序列测定。工程菌E.coli BL21/pET-gel表达产物经两步SP-Sepharose柱层析,可得电泳纯的重组gelonin,分子质量为28000u。无细胞体系蛋白质合成实验表明,其IC50(使蛋白质合成抑制50%所需浓度)为35μg/L。酶联免疫实验为阳性。
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关 键 词: | 细胞毒素 Gelonin 亚克隆 表达 纯化 |
文章编号: | 1005-8915(2002)04-0191-04 |
Subclone, Expression and Purificatin of Cytotoxin Gelonin |
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Abstract: | |
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Keywords: | Gelonin |
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