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血小板凝胶制备方法的体外实验研究
引用本文:单桂秋,李艳辉,张雅妮,刘广亚,吕品,周谋,丘勇新. 血小板凝胶制备方法的体外实验研究[J]. 中国输血杂志, 2011, 24(4): 270-274
作者姓名:单桂秋  李艳辉  张雅妮  刘广亚  吕品  周谋  丘勇新
作者单位:1. 广州军区广州总医院,输血科,广东,广州,510010;广州中医药大学
2. 广州军区广州总医院,输血科,广东,广州,510010
基金项目:广东省科技计划项目(2009B080701092); 广州市科技计划项目(10C36091671); 国家科技重大专项——新药创制
摘    要:目的优化血小板凝胶(platelet gel,PG)的制备方法。方法采用CCK-8试剂盒检测不同浓度外源性凝血酶、不同浓度血小板、血小板与激活剂不同比例制备的PG对ECV304细胞增殖的影响;通过细胞迁移试验检测不同浓度外源性凝血酶对ECV304细胞迁移的影响;采用ELISA试剂盒检测不同浓度外源性凝血酶和不同浓度血小板对VEGF释放量的影响。结果 PG促进ECV304细胞增殖和迁移;加入外源性凝血酶PG形成时间为40~60s,而不加外源性凝血酶PG形成时间600~1 200 s,但是不同浓度(0、100、1 000 U/ml)的凝血酶对ECV304细胞增殖和迁移影响甚微;PG促ECV304细胞增殖作用随血小板浓度的增加而增强,血小板浓度处于(1 500~2 500)×109/L时趋于稳定;富血小板血浆(PRP)与激活剂的比例为10∶1时促细胞增殖效果略优于5∶1;PG上清中VEGF含量随着PRP中血小板含量的增加而增加,不同浓度(0、100、1 000U/ml)凝血酶制备的PG上清中VEGF含量的差异,无统计学意义(P>0.05)。结论常规采集PRP的血小板浓度(1 000×109/L左右)已能保证细胞增殖效果、满足用于临床的PG需求;PG是否添加激活剂凝血酶应根据临床实际情况选择。

关 键 词:血小板凝胶  ECV304细胞  增殖  迁移  血管内皮生长因子

Study on the method for platelet gel preparation in vitro
SHAN Guiqiu,LI Yanhui,ZHANG Yani,et al.. Study on the method for platelet gel preparation in vitro[J]. Chinese Journal of Blood Transfusion, 2011, 24(4): 270-274
Authors:SHAN Guiqiu  LI Yanhui  ZHANG Yani  et al.
Affiliation:SHAN Guiqiu1,LI Yanhui1,2,ZHANG Yani1,et al.1.Department of Blood Transfusion,General Hospital of Guangzhou Military Command of PLA,Guangzhou 510010,China,2.Guangzhou University of Chinese Medicine
Abstract:Objective To search an optimal method for platelet gel(PG) preparation.Methods The influence of PG prepared under different conditions,including concentrations of exogenous thrombin,concentrations of platelets,proportions of platelet and activating agents on ECV304 cell proliferation were detected by Cell Counting Kit-8 assay.The influence of different concentrations of exogenous thrombin on the ECV304 cell immigration was analyzed with inverted microscope.The influence of different concentrations of exogen...
Keywords:Platelet gel  ECV304  Proliferation  Migration  VEGF  
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