| 抗重组幽门螺杆菌VacA单克隆抗体的制备 |
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| 引用本文： | 张绍兰,杨致邦,毛小琴,田一玲,黄进,邓颖. 抗重组幽门螺杆菌VacA单克隆抗体的制备[J]. 免疫学杂志, 2009, 25(1): 100-104 |
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| 作者姓名： | 张绍兰 杨致邦 毛小琴 田一玲 黄进 邓颖 |
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| 作者单位： | 重庆医科大学病原生物学教研室,重庆,400016;重庆医科大学病原生物学教研室,重庆,400016;重庆医科大学病原生物学教研室,重庆,400016;重庆医科大学病原生物学教研室,重庆,400016;重庆医科大学病原生物学教研室,重庆,400016;重庆医科大学病原生物学教研室,重庆,400016 |
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| 摘 要： | 目的 制备抗重组幽门螺杆菌致细胞空泡毒素抗原(VacA)的单克隆抗体(mAb).方法 用基因工程菌pQr30-v-DH5α大最表达重组蛋白VaeA,经Ni2+-NTA树脂纯化后,Western blot鉴定抗原性,免疫家兔后ELISA法检测血清VacA抗体鉴定其免疫原性.用重组vacA免疫Balb/c小鼠.取免疫鼠脾细胞与骨髓瘤SP2/O细胞融合,HAT选择性培养和间接EIJSA进行筛选,并检测所分泌抗体的效价和分析Ig类别.结果 获得4株能稳定分泌VacA mAb的杂交瘤细胞,能分泌IgG2b、lgM和IgG1 3类抗体,轻链均为k型.其中,IgG1 mAb经Western blot鉴定能与重组VacA发牛特异性反应.结论 应用纯化的重组VacA,成功获得了能稳定分泌幽门螺杆菌VacA单克隆抗体的杂交瘤细胞,并制备了单克隆抗体.为进一步研制检测VacA的试剂盒及探讨VacA的致病机制奠定了基础.
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| 关 键 词： | 幽门螺杆菌 致细胞空泡毒索 单克隆抗体 酶联免疫吸附试验 |
Preparation of monoclonal antibody against recombinant VacA of H.pylori |
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| ZHANG Shaolan,YANG Zhibang,MAO Xiaoqin,TIAN Yiling,HUANG Jin,DENG Ying. Preparation of monoclonal antibody against recombinant VacA of H.pylori[J]. Immunological Journal, 2009, 25(1): 100-104 |
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| Authors: | ZHANG Shaolan YANG Zhibang MAO Xiaoqin TIAN Yiling HUANG Jin DENG Ying |
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| Affiliation: | ZHANG Shaolan,YANG Zhibang,MAO Xiaoqin,TIAN Yiling,HUANG Jin,DENG Ying Department of Pathobiology,Chongqing Medical University,Chongqing 400016,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Helicobacter pylori monoclonal antibody vacuolating cytotoxin A enzyme-linked inununeosorbent assay |
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