| 人IL-26的基因克隆及其真核表达载体的构建 |
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| 引用本文： | 刘义庆,王来城,焦玉莲,张捷,马春燕,崔彬,高新谱,刘正敏,张雪,赵跃然.人IL-26的基因克隆及其真核表达载体的构建[J].山东大学学报(医学版),2006,44(6):541-544. |
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| 作者姓名： | 刘义庆 王来城 焦玉莲 张捷 马春燕 崔彬 高新谱 刘正敏 张雪 赵跃然 |
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| 作者单位： | 1. 山东省医学科学院基础医学研究所,山东,济南,250062;山东大学山东省立医院科研中心,山东,济南,250021
2. 山东大学山东省立医院科研中心,山东,济南,250021 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划) |
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| 摘 要： | 基因，构建其真核表达载体并探讨在真核细胞中的表达。方法：提取人外周血单个核细胞总RNA，逆转录 聚合酶链反应（RT PCR）扩增hIL 26基因；目的片段与pMD18 T载体连接，转化大肠杆菌E.coli DH5α,菌落PCR、酶切分析和DNA序列分析鉴定重组克隆。用SalⅠ和EcoRⅠ将目的片段切下，插入pIRES2 EGFP的相应位点，构建表达载体pIRES2 EGFP/hIL 26并进行酶切鉴定。将重组质粒用非脂质体试剂Fugene 6转染至COS7细胞中。结果：重组克隆载体pMD18 T/hIL 26内插入片段序列与GenBank上报道的hIL 26基因序列完全一致；pIRES2 EGFP/hIL 26经酶切鉴定与预期结果一致；荧光显微镜观察可见转染后的细胞有荧光出现，Western blotting 鉴定证明hIL 26基因得到了有效表达。结论：成功构建了hIL 26基因的真核表达载体并在真核细胞中获得了有效表达。
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| 关 键 词： | 白细胞介素26 基因克隆 COS7细胞 真核表达载体 |
| 文章编号： | 1671-7554（2006）06-0541-04 |
| 收稿时间： | 2005-09-20 |
| 修稿时间： | 2005-09-20 |
Cloning of human interleukin-26 and constructing of its eukaryotic expression vector |
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| LIU Yi-qing,WANG Lai-cheng,JIAO Yu-lian,ZHANG Jie,MA Chun-yan,CUI Bin,GAO Xin-pu,LIU Zheng-min,ZHANG Xue,ZHAO Yue-ran.Cloning of human interleukin-26 and constructing of its eukaryotic expression vector[J].Journal of Shandong University:Health Sciences,2006,44(6):541-544. |
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| Authors: | LIU Yi-qing WANG Lai-cheng JIAO Yu-lian ZHANG Jie MA Chun-yan CUI Bin GAO Xin-pu LIU Zheng-min ZHANG Xue ZHAO Yue-ran |
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| Institution: | 1. Institute of Basic Medicine, Shandong Academy of Medical Sciences, Jinan 250062, Shandong, China; 2. Medical Research Center, Shandong Provincial Hospital, Shandong University, Jinan 250021, Shandoneg China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Interleukin-26 Gene cloning COS7 cells Eukaryotic expression vector |
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