| 杜氏盐藻硝酸盐还原酶基因5'上游序列的克隆与序列分析 |
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| 引用本文： | 李杰,刘红涛,鲁照明,李慎柯,宋贤瑞,薛乐勋. 杜氏盐藻硝酸盐还原酶基因5'上游序列的克隆与序列分析[J]. 郑州大学学报(医学版), 2007, 42(2): 219-222 |
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| 作者姓名： | 李杰 刘红涛 鲁照明 李慎柯 宋贤瑞 薛乐勋 |
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| 作者单位： | 郑州大学细胞生物学研究室,郑州大学第一附属医院,郑州,450052 |
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| 摘 要： | 目的:克隆杜氏盐藻硝酸盐还原酶(NR)基因5'上游序列,并对其进行测序和序列分析.方法:提取杜氏盐藻基因组DNA,经过BamH I、EcoR I、Hind Ⅲ、Pst I、Sal Ⅰ及Xbal Ⅰ限制性内切酶分别酶切后,再与相应接头连接,分别构建盐藻步行基因组文库BL、EL、HL、PL、SL和XL.采用巢式(LA)-PCR方法,从上述步行基因组文库中扩增杜氏盐藻NR基因5'上游序列,克隆至pMD18-T,对酶切鉴定正确的克隆进行测序.结果:从HL里扩出约1 200 bp特异性片断,回收此片段并进行T载体克隆,对阳性克隆测序.该序列的3'端与已知NR基因cDNA 5'端序列完全一致.该序列含有多个与转录调控有关的保守序列(如CAAT-box和GAGA-box),含有与EBP、EFII、NF-E1、LV 等转录因子以及广谱激活剂Oct-1结合位点相似的核苷酸序列.结论:采用LA-PCR基因组步行方法,从已知cDNA 周围未知启动子或其他调控区域中克隆得到的NR基因的5'上游区序列,可能是一种新的杜氏盐藻启动子区序列.
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| 关 键 词： | 杜氏盐藻 硝酸盐还原酶 基因克隆 |
| 收稿时间： | 2006-03-24 |
| 修稿时间： | 2006-03-24 |
Cloning and sequencing of the 5''''-flanking region of nitrate reductase gene derived from Dunaliella salina |
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| LI Jie,LIU Hongtao,LU Zhaoming,LI Shenke,SONG Xianrui,XUE Lexun. Cloning and sequencing of the 5''''-flanking region of nitrate reductase gene derived from Dunaliella salina[J]. Journal of Zhengzhou University: Med Sci, 2007, 42(2): 219-222 |
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| Authors: | LI Jie LIU Hongtao LU Zhaoming LI Shenke SONG Xianrui XUE Lexun |
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| Affiliation: | Laboratory for Cell Biology; The First Affiliated Hospital, Zhengzhou University, Zhengzhou 450052 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Dunaliella salina nitrate reductase gene clone |
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