|
|||||
|
|
| 稳定表达细胞毒性T淋巴细胞相关抗原CTLA-4的293T细胞株的建立 | |
| 引用本文： | 茹晓荣,刘永兰,向安. 稳定表达细胞毒性T淋巴细胞相关抗原CTLA-4的293T细胞株的建立[J]. 医学分子生物学杂志, 2014, 0(5) |
| 作者姓名： | 茹晓荣 刘永兰 向安 |
| 作者单位： | 1. 西安医学院基础医学部生物化学与分子生物学教研室 西安市,710021 2. 第四军医大学药学系药物基因组学教研室 西安市,710032 |
| 摘 要： | 目的：构建稳定表达细胞毒性 T 淋巴细胞相关抗原-4（cytotoxic T lymphocyte antigen-4， CTLA-4）的293T 细胞株。方法首先从人外周血获取 PBMC 加以 T 细胞活化； PCR 扩增 CTLA-4转录本，连接pUCm-T 质粒引入 HindⅢ和 EcoRⅠ双酶切位点后转入真核细胞表达质粒 pcDNA3．1；重组质粒 pcDNA3．1-CTLA-4经脂质体转染293T 细胞，以抗生素 G418筛选表达 CTLA-4的293T 细胞；定量 PCR、免疫荧光分别检测293T 细胞 CTLA-4表达与细胞定位。结果血样来源 T 细胞经活化后表达 CTLA-4转录本。 HindⅢ和EcoRⅠ双酶切证实重组质粒内 CTLA-4插入序列正确； RT-PCR 及免疫荧光检测证实293T 细胞能够稳定表达目的蛋白 CTLA-4，并定位于细胞膜表面。结论成功构建的 pcDNA3．1-CTLA-4重组真核表达载体，在293T 细胞膜表面实现了稳定表达，为进行相关生物学理论与应用研究打下基础。 |
| 关 键 词： | T 淋巴细胞相关抗原-4 293T 细胞 基因克隆 真核表达 |
Construction of 293T Cell Line Stably Expressing CTLA-4 |
|
| RU Xiaorong,LIU Yonglan,XIANG An. Construction of 293T Cell Line Stably Expressing CTLA-4[J]. Journal of Medical Molecular Biology, 2014, 0(5) | |
| Authors: | RU Xiaorong LIU Yonglan XIANG An |
| Abstract: | |
| Keywords: | cytotoxic T lymphocyte antigen-4 (CTLA-4) human embryonic kidney 293T cell (293T) gene cloning eukaryotic expression |
| 本文献已被 万方数据 等数据库收录！ | |