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甘露糖结合凝集素对肠上皮细胞屏障功能的影响
引用本文:许超,彭科,王文生,于敏,孙力华,杨桦. 甘露糖结合凝集素对肠上皮细胞屏障功能的影响[J]. 第三军医大学学报, 2015, 37(11)
作者姓名:许超  彭科  王文生  于敏  孙力华  杨桦
作者单位:第三军医大学新桥医院普通外科,重庆,400037
摘    要:
目的 观察甘露糖结合凝集素(mannose binding lectin,MBL)对人结肠癌细胞株Caco-2屏障功能的影响并探讨其分子机制.方法 体内实验:取14只C57小鼠,按随机数字表法分为假手术组和LPS组(经腹腔注射LPS,构建肠炎症损伤模型),通过免疫组化和Real-time PCR观察MBL的变化情况,HE染色观察肠黏膜的损伤情况.体外实验:Caco-2细胞分为对照组、空转染组和MBL shRNA组(应用MBL干扰质粒转染Caco-2细胞),采用Real-time PCR、Western blot检测紧密连接蛋白的表达情况,并检测其跨上皮电阻(TER).结果 体内实验TER显示LPS组肠黏膜通透性(80.32 ±5.43)比假手术组(140.45 ±4.78)明显增加(P<0.01),HE染色显示LPS处理后肠黏膜完整性比假手术组降低,免疫组化和Real-time PCR检测结果显示LPS处理组MBL表达升高(P<0.05).在体外实验中,我们成功构建MBL shRNA质粒模型,MBL shRNA组细胞中MBL的蛋白和mRNA表达[(0.34±0.09),(0.42±0.12)]较对照组及空转染组明显降低(P<0.05).MBL shRNA组的紧密连接蛋白Occludin和Claudin-1的蛋白[(0.43±0.10)、(0.53±0.11)]和mRNA水平[(0.43±0.08)、(0.45±0.10)]明显低于其余组(P< 0.05);MBL shRNA组TER值(80.33 ±7.64)降低较其余组明显(P<0.05).结论 下调MBL基因可减少肠上皮细胞紧密连接蛋白Occludin和Claudin-1 mRNA及蛋白水平的表达,减弱肠上皮细胞的屏障保护功能.

关 键 词:甘露糖结合凝集素  紧密连接蛋白  LPS

Role of mannose binding lectin in regulation of intestinal epithelial barrier in vivo and in vitro
Xu Chao,Peng Ke,Wang Wensheng,Yu Min,Sun Lihua,Yang Hua. Role of mannose binding lectin in regulation of intestinal epithelial barrier in vivo and in vitro[J]. Acta Academiae Medicinae Militaris Tertiae, 2015, 37(11)
Authors:Xu Chao  Peng Ke  Wang Wensheng  Yu Min  Sun Lihua  Yang Hua
Abstract:
Keywords:mannose-binding lectin  tight junction proteins  LPS
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