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VEGF-C基因RNA干扰真核表达载体的构建及其效果鉴定
引用本文:周琪,梁后杰,阎晓初,彭秋平,周进明,吴峰,陈龙,边志衡.VEGF-C基因RNA干扰真核表达载体的构建及其效果鉴定[J].现代肿瘤医学,2007,15(9):1213-1216.
作者姓名:周琪  梁后杰  阎晓初  彭秋平  周进明  吴峰  陈龙  边志衡
作者单位:1. 第三军医大学西南医院病理研究所,重庆,400038;第三军医大学西南医院肿瘤科,重庆,400038
2. 第三军医大学西南医院肿瘤科,重庆,400038
3. 第三军医大学西南医院病理研究所,重庆,400038
摘    要:目的:构建VEGF-C基因RNA干扰(RNAi)的真核细胞表达载体。方法:以VEGF-C为靶基因,以pGenSil-l质粒为载体,设计构建重组体,根据GenBank数据库提供的VEGF-C基因核苷酸序列,按照Tuschl设计原则,选择设计两条带发夹结构的核苷酸序列,克隆到空载体pGenSil-l中,转化DH5α菌株,提取质粒,进行限制性内切酶酶切鉴定和测序分析,将重组的pGenSil-VEGF-C质粒转染LOVO细胞48小时,检测其对LOVO细胞VEGF-C蛋白与mRNA表达的影响。结果:经酶切鉴定筛选出的重组体测序结果与目的序列完全一致,重组载体显著降低Lovo细胞VEGF-C的蛋白和mRNA表达,重组载体构建成功。结论:利用RNAi技术可成功构建抑制VEGF-C表达的小干扰RNA重组体。

关 键 词:RNA干扰  真核表达载体  构建  鉴定
文章编号:1672-4992-(2007)09-1213-04
修稿时间:2006年12月11

Construction and effect identification of VEGF - C eukaryotic expression vector for RNA interference
ZHOU Qi,LIANG Hou-jie,YAN Xiao-chu,PENG Qiu-ping,ZHOU Jin-ming,WU Feng,CHEN Long,BIAN Zhi-heng.Construction and effect identification of VEGF - C eukaryotic expression vector for RNA interference[J].Journal of Modern Oncology,2007,15(9):1213-1216.
Authors:ZHOU Qi  LIANG Hou-jie  YAN Xiao-chu  PENG Qiu-ping  ZHOU Jin-ming  WU Feng  CHEN Long  BIAN Zhi-heng
Abstract:
Keywords:NRP2
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