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| 用Red系统敲除大肠杆菌O157:H7的ecs4553以及ecs4563基因 | |
| 引用本文： | 刘徐兵,周围,李玉霞,张京生,凌焱,胡伟,张书祥,张部昌,段海清,梁龙.用Red系统敲除大肠杆菌O157:H7的ecs4553以及ecs4563基因[J].军事医学科学院院刊,2007,31(2):101-106. |
| 作者姓名： | 刘徐兵 周围 李玉霞 张京生 凌焱 胡伟 张书祥 张部昌 段海清 梁龙 |
| 作者单位： | 1. 军事医学科学院生物工程研究所,北京,100071;安徽大学生命科学学院,合肥,230039 2. 军事医学科学院生物工程研究所,北京,100071 3. 安徽大学生命科学学院,合肥,230039 |
| 基金项目： | 解放军医药卫生科研项目 |
| 摘 要： | 目的:用Red系统快速敲除肠出血性大肠杆菌O157:H7中的分子伴侣基因,构建EHEC O157:H7的突变体.方法:本研究首先合成一对引物(每一条的5'端与ecs4553或者ecs4563基因同源,3'端与卡那霉素抗性基因同源),用pKD4为模板扩增出带有卡那霉素抗性基因的PCR产物,然后电击转化至大肠杆菌中,在λRed重组系统的帮助下,通过卡那霉素抗性基因两侧的ecs4553或者ecs4563基因序列在体内与ecs4553或者ecs4563基因发生同源重组,置换掉基因组中的ecs4553或者ecs4563基因,最后利用卡那霉素抗性基因两端的FRT位点,通过FLP位点专一性重组将卡那霉素抗性基因剔除.结果:获得了ecs4553或者ecs4563基因被精确敲除且不带卡那霉素抗性基因的EHEC O157:H7突变菌株.结论:为进一步研究EHEC O157:H7的致病机制奠定了基础. |
| 关 键 词： | 大肠杆菌O157:H7 ecs4553基因 ecs4563基因 Red同源重组 系统 敲除 大肠杆菌 基因剔除 Escherichia coli gene Knockout 致病机制 突变菌株 结果 卡那霉素抗性基因 专一性 利用 基因组 同源重组 发生 基因序列 电击转化 模板 合成 |
| 文章编号： | 1000-5501（2007）02-0101-06 |
| 修稿时间： | 2006-10-23 |
Knockout of ecs4553 and ecs4563 gene of Escherichia coli O157:H7 by Red system |
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| LIU Xu-Bing,ZHO Wei,LI Yu-Xia,ZHANG Jing-Sheng,LING Yan,HU Wei,ZHANG Shu-Xiang,ZHANG Bu-Chang,DUAN Hai-Qing,LIANG Long.Knockout of ecs4553 and ecs4563 gene of Escherichia coli O157:H7 by Red system[J].Bulletin of the Academy of Military Medical Sciences,2007,31(2):101-106. | |
| Authors: | LIU Xu-Bing ZHO Wei LI Yu-Xia ZHANG Jing-Sheng LING Yan HU Wei ZHANG Shu-Xiang ZHANG Bu-Chang DUAN Hai-Qing LIANG Long |
| Institution: | 1. Institute of Bioteehnology, Academy of Military Medical Sciences, Beijing 100071, China; 2. College of Life Science, Anhui University, Hefei 230039, China |
| Abstract: | |
| Keywords: | |
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