甲钴胺体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞向神经元样细胞分化

背景：目前骨髓间充质干细胞移植到脊髓损伤动物体内后对脊髓损伤的恢复效果非常有限。甲钴胺是治疗神经系统疾病及损伤的常见药物，其对骨髓间充质干细胞的影响尚不清楚。 目的：探讨甲钴胺体外定向诱导骨髓间充质干细胞向神经元样细胞分化的可行性，观察分化后的细胞增殖和生长情况。 方法：取大鼠胫腓骨骨髓，采用密度梯度离心贴壁细胞培养法分离、培养骨髓间充质干细胞，取第四五代骨髓间充质干细胞，分别以25，50，100 mg/L的甲钴胺进行诱导分化24，48和72 h。倒置相差显微镜下连续观察细胞形态学变化，MTT法检测细胞活性，RT-PCR和Western blot法检测特异性标志物Nestin和NSE的表达。 结果与结论：甲钴胺诱导骨髓间充质干细胞后大部分细胞变成神经元样细胞。与对照组比较，甲钴胺诱导后细胞活性无明显变化。不同剂量甲钴胺诱导48 h后，Nestin和NSE在mRNA和蛋白水平表达均上调，其中100 mg/L组表达上调最明显；100 mg/L 甲钴胺诱导24，48和72 h后，Nestin和NSE在mRNA和蛋白水平表达均上调，其中72 h表达上调最明显。说明甲钴胺可定向诱导骨髓间充质干细胞向神经元样细胞分化，100 mg/L为甲钴胺的较佳诱导浓度。

Methylcobalamin induces differentiation of rat bone mesenchymal stem cells into neuron-like cells in vitro