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甲状旁腺素相关蛋白亚基因对骨骺干细胞的调控
引用本文:张树威,金 伟,祝少博,成 昊,金 林,陶圣祥. 甲状旁腺素相关蛋白亚基因对骨骺干细胞的调控[J]. 中国组织工程研究, 2013, 17(10): 1814-1820. DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2013.10.017
作者姓名:张树威  金 伟  祝少博  成 昊  金 林  陶圣祥
作者单位:武汉大学中南医院骨科、武汉大学医学院显微外科研究所,湖北省武汉市 430071
基金项目:中央高校基本科研业务费专项资金资助项目(4101052)
摘    要:背景:甲状旁腺素相关蛋白-印第安刺猬蛋白两者相互作用调节着骨骺区软骨的分化成熟及增殖,促使骨骺区细胞处于一种相对稳定的状态。目的:分析甲状旁腺相关蛋白亚基因PTHrP(1-36)、PTHrP(38-94)和PTHrP(107-139)对骨骺干细胞的调控作用以及PTHrP(107-139)与其他调控因子的影响。方法:用脂质体介导的基因转染技术将质粒pTRE-PTHrP(1-36)、pTRE-PTHrP(38-94)和pTRE-PTHrP(107-139)分别转染pTet-on骨骺干细胞株,放入诱导分化培养基中进行培养,加入1 mg/L的强力霉素进行诱导,以RT-PCR的方法检测增殖细胞核抗原基因的表达变化。再次将质粒pTRE-PTHrP(107-139)转染pTet-on骨骺干细胞株,加入不同浓度的强力霉素进行诱导,应用RT-PCR的方法检测Ⅱ型胶原、X型胶原、印第安刺猬蛋白、Ptc、Sox9、骨形态发生蛋白6基因的表达变化。结果与结论:强力霉素诱导的质粒pTRE-PTHrP(107-139)转染组的增殖细胞核抗原表达明显高于质粒pTRE-PTHrP(1-36)转染组和质粒pTRE-PTHrP(38-94)转染组;在强力霉素诱导的质粒pTRE-PTHrP (107-139)转染组中Ⅱ型胶原、Sox-9表达明显增强,Ihh表达未见明显变化,而 Ptc、X型胶原、骨形态发生蛋白6表达明显降低。而且其表达量与强力霉素存在剂量依赖性。提示PTHrP (107-139) 可能是通过调控Sox-9、Ptc、骨形态发生蛋白6的表达来促进骨骺干细胞增殖并抑制其分化的,而PTHrP(1-36)、PTHrP(38-94)对前癌干细胞的增殖并无明显作用。pTet-on质粒系统在前癌干细胞能有效的调控外来基因的表达。

关 键 词:干细胞  干细胞培养与分化  甲状旁腺相关蛋白  印第安刺猬蛋白  骨骺干细胞  增殖  分化  增殖细胞核抗原  其他基金  干细胞图片文章  
收稿时间:2012-06-10

Parathyroid hormone-related protein sub-gene regulates precartilagenous stem cells
Zhang Shu-wei,Jin Wei,Zhu Shao-bo,Cheng Hao,Jin Lin,Tao Sheng-xiang. Parathyroid hormone-related protein sub-gene regulates precartilagenous stem cells[J]. Chinese Journal of Tissue Engineering Research, 2013, 17(10): 1814-1820. DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2013.10.017
Authors:Zhang Shu-wei  Jin Wei  Zhu Shao-bo  Cheng Hao  Jin Lin  Tao Sheng-xiang
Affiliation:Department of Orthopedics, Zhongnan Hospital of Wuhan University, Institute of Microsurgery, Wuhan University School of Medicine, Wuhan 430071, Hubei Province, China
Abstract:
Keywords:stem cells  stem cell culture and differentiation  parathyroid hormone-related protein  Indian hedgehog protein  precartilaginous stem cells  proliferation  differentiation   proliferating cell nuclear antigen   other grants-supported paper  stem cell photographs-containing paper  
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