| TNFα-Tumstatin45-132分子构建、生物学特征预测和活性验证 |
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| 引用本文： | 鲁民,罗以勤,马筱玲. TNFα-Tumstatin45-132分子构建、生物学特征预测和活性验证[J]. 临床输血与检验, 2007, 9(2): 116-119 |
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| 作者姓名： | 鲁民 罗以勤 马筱玲 |
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| 作者单位： | 1. 246001,安徽省安庆市疾病控制中心
2. 安徽省立医院检验科 |
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| 摘 要： | 目的 构建人重组TNFα-Tumstatin45-132融合蛋白的表达载体，预测接头的合理性和可行性．并对融合蛋白活性进行验证。方法 采用基因融合序列重叠延伸（s0E）策略，构建新型TNFα-Tumstatin45-132表达载体；应用核酸和蛋白质序列软件Antheprot和PepTool对融合基因及接头部位翻译后在二级结构水平上的柔性、抗原性、亲水性等生物特性加以预测；用细胞毒试验和内皮细胞增殖试验测定表达的融合蛋白活性。结果 构建新型重组TNFα-Tumstatin45-132融合基因．经DNA测序证实与设计完全一致；TNFa-Tumstatinml32融合基因的氨基酸序列经软件分析，并与TNFα和Tumstatin45-132单独分析的结果比较，未出现新的抗原性，亲水性没有改变，接头部位具有很低的抗原性，接头部位呈中性；表达的融合蛋白经证实具有杀伤L929细胞和抑制ECV304细胞增殖的作用。结论 通过计算机软件对TNFα-Tumstatin45-132融合蛋白的预测，并与TNFα和Tumstatin45-132分别对比分析，有利于合理设计融合蛋白，最大程度地保留TNFα和Tumstatin45-132各自的生物活性和功能；生物活性分析证实设计具有一定的科学性和合理性。
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| 关 键 词： | 融合蛋白 肿瘤坏死因子 Tumstatin45-132 计算机模拟 |
| 文章编号： | 1671-2587（2007）02-0116-04 |
| 收稿时间： | 2006-09-11 |
| 修稿时间： | 2006-09-11 |
Construction, Biological Characteristics Prediction and Bioactivity Certification of TNFα- Tumstatin45-132 |
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| LU Min,LUO Yi-qin,MA Xiao-ling. Construction, Biological Characteristics Prediction and Bioactivity Certification of TNFα- Tumstatin45-132[J]. Journal of Clinical Transfusion and Laboratory Medicine, 2007, 9(2): 116-119 |
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| Authors: | LU Min LUO Yi-qin MA Xiao-ling |
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