| 慢病毒介导的Stat3沉默对成牙骨质细胞分化、凋亡、自噬的影响 |
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| 作者单位： | ;1.武汉大学口腔医学院口腔基础医学省部共建国家重点实验室培训基地/口腔生物医学教育部重点实验室;2.武汉大学口腔医院正畸一科;3.武汉大学口腔医院牙周科 |
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| 摘 要： | 目的:构建Stat3-shRNA慢病毒表达载体,观察慢病毒介导的信号传导及转录激活因子3(Stat3)沉默对小鼠成牙骨质细胞OCCM-30分化、凋亡、自噬的影响及相关机制。方法:构建含有Stat3shRNA的慢病毒载体,包装慢病毒后感染OCCM-30细胞,使用嘌呤霉素筛选出稳定细胞株。采用real-time PCR和Western Blot法检测慢病毒对Stat3的抑制效果。将细胞分成空白对照组、阴性对照组和Stat3抑制组三组,采用Western Blot检测Atg-5,Beclin-1,cleaved caspase-3,survivin蛋白水平的变化,使用real-time PCR法检测BSP,OCN,osterix在mRNA水平的变化。结果:成功构建Stat3-shRNA慢病毒表达载体并用慢病毒感染OCCM-30细胞,有效降低了Stat3的mRNA和蛋白的表达量。在mRNA水平上,Stat3抑制组BSP,OCN,osterix表达量降低。由Western Blot结果可知,Stat3抑制组Atg-5,Beclin-1,survivin蛋白表达量明显降低,cleaved caspase-3蛋白表达量增加。结论:慢病毒介导的Stat3-shRNA可有效抑制OCCM-30细胞内Stat3基因表达,从而抑制细胞分化和自噬,诱导凋亡,其相关机制可能是通过抑制Stat3信号转导通路实现的。
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| 关 键 词： | 慢病毒 shRNA 成牙骨质细胞 Stat3 |
Effects of Stat3 Gene Silencing by Lentivirus-Mediated shRNA on Cementoblast Differentiation,Apoptosis and Autophagy |
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