Sinerem标记大鼠骨髓基质细胞及移植后活体示踪研究

目的初步探索利用欣诺（Sinerem）和转染试剂体外磁性标记大鼠骨髓基质细胞这一方法的可行性，为将来临床上应用MRI追踪标记细胞奠定基础。方法无菌条件下行股骨取骨髓，梯度密度离心法分离获取大鼠骨髓基质细胞，使用Sinerem-多聚赖氨酸复合物（SE—PLL）标记骨髓基质细胞，采用普鲁士兰染色、电镜和台盼蓝排除实验等方法鉴定SE—PLL标记大鼠骨髓基质细胞的效率和细胞的活力，并对SE—PLL标记骨髓基质细胞的增殖和分化能力进行评估。将SE—PLL标记和未标记后的骨髓基质细胞分别移植入大鼠左右侧尾壳核脑内，细胞移植后1、4、7w应用MRI对脑内移植的细胞进行活体示踪，最后利用组织切片进行普鲁士兰染色。结果Sinerem可以高效率地标记骨髓基质细胞，标记效率在99％左右。普鲁士蓝染色显示SE—PLL标记骨髓基质细胞胞质内出现细小的蓝色铁颗粒。电镜结果显示sE—PLL标记的骨髓基质细胞胞质内含有许多包裹铁颗粒的囊泡。与正常未标记的细胞相比较，SE—PLL标记对骨髓基质细胞的活力、增殖和分化等能力没有明显的影响。MRI检查发现脑内移植的标记细胞在磁共振上呈明显的低信号改变，未标记细胞侧脑组织无明显的低信号改变，与组织学切片结果基本一致。结论以上结果提示Sinerem可以用来体外标记骨髓基质细胞，利用MRI技术可以对脑内移植后的标记细胞进行初步的活体追踪。

Primary study on labeling of bone marrow stromal cells with Sinerem and in vivo tracking

Objective To explore the feasibility of protocols using Sinerem and transfection agents for in vivo magnetic labeling of bone marrow stromal cells (BMSCs) as a basis of the clinical application of MRI. Methods Under the sterile condition,the rat bone marrow stromal cells were harvested by means of density gradient centrifugation following a thighbone puncture. Sinerem-poly-L-lysine (SE-PLL) complexes were used to label BMSCs magnetically. The efficiency and cellular viability of SE-PLL labeled BMSCs were ev...