促红细胞生成素通过激活ERK和p38 MAPK抑制小鼠骨髓间充质干细胞成脂分化

目的：探讨促红细胞生成素（EPO)是否抑制小鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)分化为脂肪细胞及其机制。方法：分离提取小鼠骨髓MSCs,用3-异丁基-1-甲基黄嘌呤、胰岛素和地塞米松联合诱导成脂分化,实验组加入不同浓度EPO干预,诱导分化第20天油红O染色观察并进行定量分析细胞分化程度;MTT法观察不同浓度EPO对MSCs增殖能力的影响。实时荧光定量PCR检测过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）、CCAAT/增强子结合蛋白α（C/EBPα）、脂肪酸结合蛋白4（FABP4）和脂联素mRNA表达水平;Westernblotting检测PPARγ及细胞外信号调节激酶（ERK）和p38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）磷酸化水平。结果：诱导分化20d,EPO能显著抑制MSCs的成脂分化,降低油红O染色后的吸光度值,诱导分化过程中各浓度的EPO不影响MSCs增殖活性。EPO能够下调成脂过程中PPARγ、C/EBPα、FABP4和脂联素mRNA表达,增加分化过程中ERK、p38MAPK及PPARγ蛋白磷酸化。结论：EPO可能通过增加p38MAPK和ERK蛋白磷酸化,下调PPARγ、C/EBPα、FABP4和脂联素mRNA表达,从而抑制MSCs成脂分化。