黄芩甙诱导人脐血间充质干细胞分化为神经元样细胞

目的探讨中药黄芩甙体外诱导人脐血间充质干细胞（MSCS）分化为神经元样细胞的可行性及其可能的机制。方法无菌条件下采集正常足月胎儿的脐带血,经肝素抗凝,用相对密度1．077的淋巴细胞分离液分离脐血单个核细胞,加入含黄芩甙50μmol/L的液体培养体系中进行扩增培养。取扩增培养2周的人脐血MSCS进行诱导实验。实验共分3组：诱导组（诱导液和维持液均含黄芩甙300～400μmol/L）；对照1组（诱导液和维持液均不含黄芩甙及其它抗氧化剂）；对照2组（诱导液和维持液均含3mmol/Lβ-巯基乙醇、20g/L二甲基亚砜和20mmol/L丁化羟基苯甲醚,不含黄芩甙）。诱导30min后开始在倒置显微镜下动态观察人脐血MSCS生长情况及诱导前后形态学变化。各组分别在诱导6h、24h、7d留取标本制作细胞爬片,用免疫细胞化学染色法评价神经细胞特异性烯醇化酶（NSE）和微管相关蛋白2（MAP-2）阳性细胞的表达率。用Hoechest 33258染色法评价各组细胞存活率。结果黄芩甙诱导7d后,人脐血MSCS形成较典型的神经元样细胞形态,免疫细胞化学染色显示黄芩甙诱导组NSE、MAP-2阳性细胞表达率及细胞存活率分别为77．2％±9．8％、76．6％±6．2％、86．5％±5．2％,显著高于对照1、2组（P＜0．01）。分别为4．6％±0．7％、0．7％±0．5％、45．7％±8．3％和68．9％±4．5％、51．5％±5．2％、71．6％±6．4％。结论黄芩甙能诱导人脐血MSCS分化为神经元样细胞,其诱导作用温和、稳定而持久,其诱导机制可能与黄芩甙的抗氧化、调控细胞NF-κB的活性从而刺激多种细胞因子的生成有关。

Differentiation of human umbilical cord blood mesenchymal stem cells into neuron-like cells by baicalin