|
|||||
|
|
| 一种分离、培养扩增小鼠NK细胞方法的建立 | |
| 引用本文： | 杨志刚,曾耀英,何贤辉,王通,江逊,唐德燊. 一种分离、培养扩增小鼠NK细胞方法的建立[J]. 细胞与分子免疫学杂志, 2005, 21(3): 379-381,389 |
| 作者姓名： | 杨志刚 曾耀英 何贤辉 王通 江逊 唐德燊 |
| 作者单位： | 1. 暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室,广东,广州,510632;广东医学院附属医院,广东,湛江,524001 2. 暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室,广东,广州,510632 3. 广东医学院附属医院,广东,湛江,524001 |
| 基金项目： | 国家重点基础研究发展规划(973)项目(No.G2000057006)，家自然科学基金重点项目(No.30230350) |
| 摘 要： | 目的:建立小鼠NK细胞的分离及培养扩增的方法。方法:用两步黏附分离法和磁珠活化的细胞分选(MACS)法,从小鼠脾脏的单个核细胞(MNC)中分离NK细胞,计数所得细胞的总数,并用FITC抗小鼠CD3和PE抗小鼠NK1.1单克隆荧光抗体染色后,用流式细胞仪(FACS)检测NK细胞的纯度。以YAC -1为靶细胞,用MTT比色法检测NK细胞的杀伤活性。结果:将两步黏附分离法分离的2×107个脾MNC培养5、10、15、20d,计数细胞的总数并检测CD3-NK1.1 细胞百分率,分别为0.5×107、1.4×107、2.6×107、3.0×107和18.36%、43.44%、55.68%、60.03%。效靶细胞25∶1时,NK细胞的杀伤率分别为54.38%、66.54%、79.38%和83.86%,明显高于脾MNC(41.93%)(P<0.01)。MACS法纯化前后细胞的总数和CD3-NK1.1 细胞的百分率,分别为1.0×108、1.5×106和2.54%、93.60%;但纯化后的细胞在体外培养20d时,只扩增到1.9×106个。结论:用两步黏附分离法分离的小鼠NK细胞,培养2～3wk可获得大量的NK细胞,纯度可达55%～60%;在效靶细胞为25∶1时,NK细胞对YAC1细胞的杀伤率约为80%。 |
| 关 键 词： | NK细胞 分离 培养 扩增增殖 IL-2 |
| 文章编号： | 1007-8738(2005)03-0379-04 |
Development of a method for isolation,culture and proliferation of mouse NK cells |
|
| YANG Zhi-gang,ZENG Yao-ying,HE Xian-hui,WANG Tong,JIANG Xun,TANG De-shen. Development of a method for isolation,culture and proliferation of mouse NK cells[J]. Chinese journal of cellular and molecular immunology, 2005, 21(3): 379-381,389 | |
| Authors: | YANG Zhi-gang ZENG Yao-ying HE Xian-hui WANG Tong JIANG Xun TANG De-shen |
| Affiliation: | YANG Zhi-gang~ |
| Abstract: | |
| Keywords: | NK cell isolation culture amplified proliferation rhIL-2 |
| 本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录！ | |