|
|||||
|
|
| CyclinD1基因过表达慢病毒载体的构建和对神经干细胞增殖的影响 | |
| 引用本文： | 马俊芳,崔博,沈东超,崔丽英.CyclinD1基因过表达慢病毒载体的构建和对神经干细胞增殖的影响[J].国外医学：物理医学与康复学分册,2015(2):98-101. |
| 作者姓名： | 马俊芳 崔博 沈东超 崔丽英 |
| 作者单位： | 1. 中国医学科学院北京协和医院神经内科北京 100730; 安徽医科大学附属省立医院神经内科合肥 230001 2. 中国医学科学院北京协和医院神经内科北京 100730 3. 中国医学科学院北京协和医院神经内科北京 100730; 中国医学科学院神经科学中心北京 100730 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金青年基金(No.81100876)；中国博管会基金面上项目(No.2014M560910)；中国医学科学院院校博士后基金 |
| 摘 要： | 目的:针对小鼠cyclinD1基因构建质粒并进行慢病毒包装,转染小鼠神经干细胞,检测其表达水平。方法:根据cyclinD1基因信息,采用DNA重组技术将Nestin promoter-Ccnd1基因插入plenti6慢病毒表达载体,重组获得慢病毒载体plenti-D1;经测序鉴定后,转染293T细胞生产病毒液,并检测病毒滴度。设立空白对照组、阴性病毒对照组及过表达慢病毒感染组。将病毒转染小鼠胚胎神经干细胞,经实时荧光定量PCR和western blot法分析转染前后3组cyclinD1表达情况,MTT法检测不同MOI值对神经干细胞增殖的影响。结果:测序结果证实cyclinD1基因正确插入载体中,成功构建小鼠cyclinD1基因过表达载体。实时荧光定量PCR结果显示过表达慢病毒感染组cyclinD1 mRNA较其他2组明显升高;Western Blot鉴定cyclinD1蛋白表达成功。plenti-D1的MOI值为10、20、50时均明显促进神经干细胞增殖。结论:cyclinD1基因慢病毒表达载体能感染小鼠胚胎神经干细胞,外源基因稳定表达。cyclinD1基因过表达能促进神经干细胞的增殖。 |
| 关 键 词： | cyclinD1 过表达 神经干细胞 细胞周期 |
Construction of CyclinD1 Gene Overexpression Lentivirus Vector and Its Effect on the Proliferation of Neural Stem Cells |
|
| MA Jun-fang,CUI Bo,SHEN Dong-chao,CUI Li-ying.Construction of CyclinD1 Gene Overexpression Lentivirus Vector and Its Effect on the Proliferation of Neural Stem Cells[J].Neural Injury and Functional Reconstruction,2015(2):98-101. | |
| Authors: | MA Jun-fang CUI Bo SHEN Dong-chao CUI Li-ying |
| Institution: | MA Jun-fang;CUI Bo;SHEN Dong-chao;CUI Li-ying;Department of Neurology, Peking Union Medical College Hospital, Chinese Academy of Medical Science&Peking Union Medical College; |
| Abstract: | |
| Keywords: | cyclinD1 over expression neural stem cell cell cycle |
| 本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录！ | |