| 人DC-SIGN真核表达载体的构建及在K-562细胞中的表达 |
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| 引用本文： | 李军,冯志华,聂青和,李光玉,牟丹蕾,张亚飞.人DC-SIGN真核表达载体的构建及在K-562细胞中的表达[J].肝脏,2006,11(1):24-27. |
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| 作者姓名： | 李军 冯志华 聂青和 李光玉 牟丹蕾 张亚飞 |
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| 作者单位： | 710038,西安,第四军医大学唐都医院传染病科、全军感染病诊疗中心;710038,西安,第四军医大学唐都医院传染病科、全军感染病诊疗中心;710038,西安,第四军医大学唐都医院传染病科、全军感染病诊疗中心;710038,西安,第四军医大学唐都医院传染病科、全军感染病诊疗中心;710038,西安,第四军医大学唐都医院传染病科、全军感染病诊疗中心;710038,西安,第四军医大学唐都医院传染病科、全军感染病诊疗中心 |
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| 摘 要： | 目的构建含人DC-SIGN基因的真核表达载体,探讨DC-SIGN在K-562细胞中的表达,为研究丙型肝炎病毒(HCV)与DC-SIGN的相互作用奠定基础.方法分离人外周血单个核细胞,体外诱导分化为树突状细胞(DC);提取细胞总RNA并反转录为cDNA,设计上下游引物,利用PCR技术扩增DC-SIGN片段,连接入克隆载体pGEM-T easy;应用双酶切回收基因片段,定向克隆入真核表达载体pCDNA3.1;通过脂质体介导的基因转染技术将pCDNA3.1-DC-SIGN和空载体转入K-562细胞,应用G-418筛选稳定表达DC-SIGN的K-562细胞,以DC-SIGN单抗通过免疫荧光法检测K-562细胞的表达产物.结果 PBMC体外成功刺激分化为DC,含DC-SIGN基因的克隆载体pGEM-DC-SIGN经酶切、PCR及测序鉴定分析正确,pCDNA3.1-DC-SIGN经酶切、PCR鉴定分析正确,DC-SIGN可在K-562细胞表面稳定表达.结论 DC-SIGN可在K-562细胞中大量表达,为进一步研究DC-SIGN在HCV感染中的作用奠定了基础.
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| 关 键 词： | 肝炎病毒 丙型 树突状细胞 DC-SIGN 真核表达 |
| 收稿时间： | 2005-12-09 |
| 修稿时间： | 2005年12月9日 |
Construction of eukaryotic expression vector harboring human DC-SIGN gene and identification of expressed protein in K-562 cells |
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| LI Jun,FENG Zhi-hua,NIE Qing-he,LI Guang-yu,MOU Dan-lei,ZHANG Ya-fei.Construction of eukaryotic expression vector harboring human DC-SIGN gene and identification of expressed protein in K-562 cells[J].Chinese Hepatology,2006,11(1):24-27. |
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| Authors: | LI Jun FENG Zhi-hua NIE Qing-he LI Guang-yu MOU Dan-lei ZHANG Ya-fei |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Hepatitis C virus Dendritic cells DC-SIGN eukaryotic expression |
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