RP-HPLC测定重组人促卵泡激素中唾液酸含量

目的:建立简便、快速、灵敏、准确的适用于重组人促卵泡激素中唾液酸的含量测定方法。方法:采用弱酸水解重组人促卵泡激素(rhFSH),释放出唾液酸,用邻苯二胺衍生化,采用反相高效液相色谱法测定。色谱柱为 Jupiter C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为 A-B(87:13),其中流动相 A 为含0.15%1-氨基丁烷、0.5%磷酸、1%四氢呋喃的水溶液,流动相 B为流动相 A 与乙腈比例为1:1的溶液;流速为1.0 mL·min~(-1);柱温为25℃;检测波长为214 nm。结果:唾液酸进样量在54.5～2180 ng 范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9999)。低、中、高3种浓度平均加样回收率(n=3)为98.83%,100.6%,102.6%;RSD 分别为2.7%,0.03%,0.17%。结论:本法简便、快速,结果准确、可靠,重复性好。

RP-HPLC determination of sialic acid in recombinant human follicle stimulating hormone