| RHD基因的克隆及其在K562细胞中的表达 |
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| 引用本文： | 严力行,许先国,朱发明,何吉. RHD基因的克隆及其在K562细胞中的表达[J]. 中国实验血液学杂志, 2005, 13(3): 492-495 |
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| 作者姓名： | 严力行 许先国 朱发明 何吉 |
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| 作者单位： | 浙江省血液中心,杭州,310006 |
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| 基金项目： | 浙江省自然科学基金(M303194)，浙江省医药卫生科研基金(2002A024) |
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| 摘 要： | 本研究目的在于克隆人类红细胞RHD基因，构建RhD表达载体，观察其在K562细胞中的表达。从脐血网织红细胞中提取总RNA，采用逆转录聚合酶链反应扩增RHD／CE基因，扩增产物通过TA连接克隆到pGEM-T质粒，采用测序方法筛选多个克隆获得RHD基因。将获得的RHD基因进一步亚克隆构建pcDNA3．1(-)表达载体。重组表达载体通过superfect试剂盒转染K562细胞，最后观察K562细胞中RHD基因的转录和表达。结果表明：成功分离克隆到RHD基因，构建的pcDNA3.1(-)重组表达载体经酶切和测序证实RHD cDNA序列及插入方向正确。转染后的K562细胞内有相应的mRNA转录，细胞表面有RhD抗原表达。结论：RHD cDNA转染的K562细胞能表达RhD抗原，该表达体系有助于进一步研究各种RhD变异型的分子基础。
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| 关 键 词： | RHD基因 RhD抗原 K562 cell Rh血型系统 |
| 文章编号： | 1009-2137(2005)03-0492-04 |
| 修稿时间： | 2004-06-14 |
Cloning of Human RHD Gene and Its Expression in K562 Cells |
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| YAN Li-xing,XU Xian-guo,ZHU Fa-ming,He Ji. Cloning of Human RHD Gene and Its Expression in K562 Cells[J]. Journal of experimental hematology, 2005, 13(3): 492-495 |
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| Authors: | YAN Li-xing XU Xian-guo ZHU Fa-ming He Ji |
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| Affiliation: | Blood Center of Zhejiang Province, Hangzhou 310006, China. |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | RHD gene RhD antigen K562 cell Rh blood group system |
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