RACE策略克隆抗人CD16单克隆抗体轻链可变区基因 |
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引用本文: | 解志刚,郭宁,冯健男,施明,孙瑛勋,于鸣,沈倍奋.RACE策略克隆抗人CD16单克隆抗体轻链可变区基因[J].细胞与分子免疫学杂志,2003,19(1):82-83. |
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作者姓名: | 解志刚 郭宁 冯健男 施明 孙瑛勋 于鸣 沈倍奋 |
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作者单位: | 军事医学科学院基础医学研究所,北京,100850 |
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基金项目: | 国家“863”计划课题基金资助(No.2001AA215081) |
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摘 要: | 鼠源性单克隆抗体(mAb)应用于人体治疗首先需对其进行基因工程化改造。目前,常用的克隆mAb可变区基因的方法,是利用抗体可变区内骨架区(FR)序列的保守性,设计一组通用引物,采用RT-PCR法扩增可变区基因1,2]。但由于引物的简并性,克隆过程中将不可避免地改变抗体可变区两侧(FR1、FR4)的氨基酸序列,这些改变可能导致基因工程抗体亲和力降低3]。我们对传统方法进行了改进,采用5’-RACE(rapid amplification of cDNA end,RACE)克隆的策略,获得了抗人CD16 mAb轻链可变区(VL)基因的真实序列。
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关 键 词: | RACE策略 抗人CD16单克隆抗体 基因克隆 基因序列 |
文章编号: | 1007-8738(2003)01-082-02 |
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